BMI1对依托泊苷抑制乳腺癌细胞MCF7增殖的影响(2)
1.3 MTT法检测细胞增殖取处于对数生长期的MCF7细胞,以100 μL/孔,细胞浓度1×105个/mL,以加入96孔细胞培养板,培养细胞至贴壁后,环磷酰胺组每孔加入100 mg/L环磷酰胺药液200 μL;实验组每孔加入100 mg/L依托泊苷药液200 μL,对照组每孔加入等体积的培养基。在饱和湿度、37℃、5%CO2浓度培养条件下,分别培养24、48、72 h。在终止培养前4 h,每孔加入10 μL MTT染液(10 mg/mL),正常条件继续培养4 h后,每孔加入100 μL SDS药液(100 g/L)终止培养,37℃放置过夜,酶标仪检测波长为570 nm条件下的OD值,计算细胞生长抑制率(IR)[9]。抑制率(%)=(OD值对照组-OD值实验组)/OD值对照组×100%。
1.4 流式细胞术检测依托泊苷对MCF7细胞周期和细胞凋亡的影响
取-20℃预冷的70%乙醇固定的细胞样品,用预冷的PBS洗涤两次,加PI染液,4℃避光染色30 min ......
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