1.2.9 划痕试验 将分离、培养至第2～4代的心脏成纤维细胞种于6孔板中，每孔约5×105细胞量直至70%～80%的密度。用无菌的200 μL枪头在各孔中划一笔直的划痕。PBS洗涤3次，每次3 min。洗去因划痕而死亡脱落的细胞。显微镜下拍照，以显示最初始的两侧心脏成纤维细胞间的距离。随后加入不含血清的培养基，37℃，5% CO2培养箱中培养24 h，拍摄各组细胞之间的迁移情况。

    1.3 统计学方法

    所有数据应用SPSS20.0软件进行统计学分析。生存率的比较采用Log-rank (Mantel-Cox)检验方法。计量资料以均数±标准差(x±s)表示，采用单因素方差分析，两两比较采用LSD分析，P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 ALK4敲除改善心梗后死亡率和心功能

    心梗后梗死边缘区ALK4表达增加，ALK4敲除显著抑制心梗后ALK4蛋白表达(P<0.05)。心梗后28 d，与野生型同窝对照小鼠相比，ALK4+/-小鼠生存率升高[ALK+/-(77.1)% vs WT(54.3)%，P<0.05]。心脏超声结果显示ALK4+/-小鼠的LVEF和FS较野生型小鼠均明显改善[LVEF：ALK+/-(48.5±3.5)% vs WT(29.3±3.8)% ......