一过性食管下括约肌松弛动物模型的建立及其机制探讨(2)
1 材料与方法1.1 實验动物
SPF级健康雄性SD大鼠48只,体重350~400 g,平均2.5月龄,均由上海西普尔-必凯实验动物有限公司[SCXK(沪)2013-0016]提供,随机分为4组:空白对照组、模型组、药物注射(saclofen)组、空白注射组,每组12只。该实验在浙江中医药大学动物实验研究中心完成[SYXK(浙)2013-0184]。
1.2 实验方法
1.2.1 胃扩张诱发TLESR模型 大鼠予10%水合氯醛(0.35 mL/100 g 体重)腹腔注射麻醉(禁食10 h)后,予轻柔地插一端套有薄膜囊的聚乙烯软管入胃,深度为下食管括约肌下4 cm,向气囊内注水,给予胃内压≥5.32 kPa(40 mm Hg)压力的时相性胃扩张(注水2 min,间歇4 min,交替进行,6 min为1轮,共10轮)[7,8]。
1.2.2 孤束核内微量注射针的埋入 大鼠腹腔注射麻醉后,固定于立体定向仪上,切开大鼠头部皮肤,暴露骨缝,参照 LJ.Pellegrine 鼠脑定向图谱,颅骨钻孔,埋植不锈钢套管(外径0.5 mm,内置直经0.3 mm的不锈钢丝,其下端比套管长0.5 mm),微量注射时,将不锈钢丝内芯拔出,微量注射针超出外套管1 mm,用于局部微量注射。
1.2.3 实验流程 将适度麻醉的大鼠仰卧固定于实验台上 ......
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