ABT-737逆转EGFR T790M突变肺腺癌细胞EGFR-TKIs耐药的机制研究(3)
1.2.4 组织病理学检测 将裸鼠瘤体组织石蜡切片常规脱蜡脱水,行苏木素-伊红(HE)染色:烤片,二甲苯透明、经梯度乙醇脱水置换后,HE染色,二甲苯透明后封片。图文分析仪分析每例切片。1.2.5 免疫组化法 裸鼠瘤体组织石蜡切片常规脱蜡脱水,3% H2O2室温封闭,高压抗原修复,山羊血清封闭液封闭,稀释的Bim、Bak及Caspase-3抗体4℃过夜,24 h后辣根酶标记山羊抗兔 IgG 聚合物孵育30 min,后DAB染色,苏木素复染,镜像观察。
1.3 统计学分析
采用统计学软件SPSS20.0分析数据,计量资料以(x±s)表示,组间比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 ABT-737逆转EGFR T790M突变所致EGFR-TKIs耐药的细胞研究
2.1.1 RPC-9细胞EGFR基因检测 RPC-9细胞EGFR基因E20发生突变,核苷酸变化c.2369C>CT;氨基酸变化790T>T/M(图1)。
A.EGFR-E19参考峰;B.RPC-9细胞EGFR-E19测序峰;C.EGFR-E20参考峰;D.RPC-9细胞EGFR-E20测序峰。RPC-9细胞EGFR-E20核苷酸变化c.2369C>CT;氨基酸变化790T>T/M
2.1.2 MTT法檢测细胞抑制率 Ⅰ组各种浓度的ABT-737和Ⅱ组ABT-737联合吉非替尼组(10 μmol/L)均能抑制RPC-9细胞增殖 ......
您现在查看是摘要页,全文长 5055 字符。