人胃癌SGC-7901细胞内新藤黄酸含量测定HPLC法的建立及应用(2)
1.2 药品与试剂新藤黄酸(牡丹江医学院药学研究所提供,纯度>98%),藤黄酸(牡丹江医学院药学研究所提供,纯度>98%),RPMI-1640培养基(美国GIBCO公司,批号:1790007),无支原体新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司,批号:180503),RIPA裂解液(碧云天生物技术),人胃癌SGC-7901细胞(牡丹江医学院药学研究所提供)。
1.3 溶液的制备[6,7]
1.3.1 储备液的配制 电子分析天平称取新藤黄酸(NGA)、藤黄酸(GA)各10.0 mg,用甲醇10 mL容量瓶内定容,混匀溶解得1 mg/mL溶液,4℃储存。
1.3.2 细胞裂解液的制备 将SGC-7901于六孔板培养,保持贴壁状态下用磷酸盐缓冲液(PBS)小心冲洗3次,每孔加入200 μL的RIPA裂解液,裂解1 min后收集裂解液。
1.3.3 细胞内液的制备 空白细胞液的制备:未给药的SGC-7901细胞用RIPA裂解液裂解 ......
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