1.2 方法

    1.2.1 呼出气冷凝液收集保存 采用自制EBC收集器进行收集[5]。符合入组条件的老年稳定期COPD患者门诊就诊当天或入院24 h内收集EBC。收集前患者休息15 min，漱口清洁口腔，常规带鼻夹，通过咬口器平静呼吸，收集器预冷20 min后收集呼出气的冷凝物，持续20 min，融化后收集EBC 1～3 mL，在此期间患者如有唾液吐出或咳嗽则暂停收集以防污染。收集EBC样品予离心后分装，-80℃冰箱保存待检。每次收集后取样管用去离子水冲洗3遍高压蒸汽灭菌待用。

    1.2.2 EBC及血清炎症因子水平检测 收集EBC，当天空腹状态下抽取静脉血5 mL，室温血液自然凝固10～20 min，4000 r/min离心5 min，留上清置于2 mL Eppendor管中-80℃保存待测。采用双抗体夹心ELISA法，在同一条件下检测老年COPD稳定期患者EBC及血清sTREM-1水平(sTREM-1试剂盒购自美国R&D公司)，hs-CRP由我院生化实验室检测。所有实验操作过程均严格按照试剂盒说明书进行 ......