双氢青蒿素对低氧下人肺动脉内皮细胞增殖和分泌功能影响(3)
1.2.6 各组细胞上清液中的NO检测(硝酸还原酶法) 各组细胞造模48 h后,小心提取各组细胞上清液0.1 mL,按NO检测试剂盒步骤,按先后顺序与试剂盒中检测试剂一和试剂二混合,旋涡振荡充分混合后,置37℃恒温水浴准确60 min,再按先后顺序加入试剂三和试剂四混合,旋涡振荡充分混合30 s后,在室温下静置10 min,上离心机(3500~4000)转/min,离心10 min,提取上清液0.5 mL,加入0.6 mL 显色剂混匀,在室温下放置10 min后,在酶标仪上550 nm处测吸光度OD值,然后根据试剂盒中提供的公式计算NO含量(μmol/L)。1.3 观察指标
所培养的细胞经CD31免疫荧光染色发绿色荧光为内皮细胞;所有各组细胞造模48 h后结束,按实验内容要求收集细胞或上清液,分别测定各组HPAECs的增殖能力、细胞上清液中的SOD活力、细胞上清液中的NO含量,然后根据所获得的数据进行统计学处理分析。
1.4 统计学处理
采用SPSS 22.0统计学软件进行统计分析,计量资料均以均数±标准差(x±s)表示 ......
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