苦参碱对TGF-β1诱导的人腹膜间皮细胞ETS2表达的影响(2)
1 材料与方法1.1 材料
人腹膜间皮细胞系(HPMC)购买于广州吉赛科技有限公司,苦参碱购于北京博奥拓达科技有限公司(CAS NO:16837-52-8),ETS2、α-SMA和E-cadherin单克隆抗体购于CST公司。
1.2 方法
1.2.1 实验分组 将人腹膜间皮细胞按照不同处理方法分为空白对照组(完全培养基培养48 h)、TGF-β1诱导组(给予5 ng/mL TGF-β1刺激48 h)、TGF-β1+0.4 mg/mL苦参碱干预组(给予5 ng/mL TGF-β1+0.4 mg/mL苦参碱处理48 h)、TGF-β1+0.8 mg/mL苦参碱干预组(给予5 ng/mL TGF-β1+0.8 mg/mL苦参碱处理48 h)和TGF-β1+1.2 mg/mL苦參碱干预组(给予5 ng/mL TGF-β1+1.2 mg/mL苦参碱处理48 h)。
1.2.2 人腹膜间皮细胞培养及药物干预 复苏细胞并传代培养,待细胞长至80%融合时胰酶消化,接种于6孔板中培养,待细胞长至70%~80%时进行干预实验。诱导人腹膜间皮细胞EMT的TGF-β1浓度为5 ng/mL ......
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