miR-451a和MMP-2蛋白在结直肠癌组织中的表达及对肿瘤细胞增殖的影响(2)
1 材料与方法1.1 材料来源
12例结肠癌组织和癌旁组织取自2018年金华市中心医院手术切除的标本。所有患者术前均未接受过放化疗，术后病理诊断证实均为结肠癌Ⅱ期中分化腺癌。标本：男6例，女6例，本研究获得金华市中心医院伦理委员会批准，组织标本的收集均征得患者本人的知情同意。人结直肠癌细胞株HT29、HCT116、SW480购自中国科学院上海细胞资源中心，人结肠正常黏膜上皮细胞株NCM60本实验室保存;过表达pcDNA-miR451a(pcDNA-miR-451a-mimic)、pcDNA-NC、psilencer-MMP-2pcDNA-MMP-2及对照质粒psilencer-Scr由上海吉凯生物公司构建，miR-451a RT PCR引物购自北京擎科有限责任公司;Lipofectamine TM 3000转染试剂盒购自Invitrogen公司;MMP-2抗体购自CST公司;GAPDH抗体、辣根酶过氧化物标记山羊抗小鼠、山羊抗兔二抗购自北京百奥莱博科技有限公司 ......
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