慢病毒载体介导的Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响(3)
1.7 Tunel染色采用Tunel试剂盒对各组生长处于对数的HSC-T6细胞凋亡情况进行检测,经DAPI染色后细胞核及凋亡神经元细胞分别呈现蓝色荧光及绿色荧光,采用激光共聚焦荧光显微镜进行观察,每个脑片随机选取5个视野,采用Image.ProPlus图像分析处理系统软件进行凋亡细胞数的计算。凋亡细胞率=(绿色荧光的凋亡细胞数/DAPI染色的总细胞数)×100%。
1.8 统计学方法
应用SPSS20.0统计学软件对结果进行处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,计量资料两组比较采用t检验,多组间比较采用One-Way ANOVA单因素方差分析,Western Blott及Tunel染色图片利用oringe软件及Image J软件进行作图及图片处理,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 慢病毒感染靶细胞情况及转染效率评估
结果显示利用慢病毒载体成功感染了293T细胞,利用荧光显微镜观察各组293T细胞,结果证实构建的重组病毒载体LV3-H1-GFP-shRNA可有效感染293T细胞 ......
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