miR-1与miR-499对心肌细胞增殖与凋亡调控作用及机制研究(2)
[Key words] miR-1;miR-499;Regulation;Cardiomyocyte;Apoptosis心肌细胞凋亡与心脏疾病密切相关,包括心肌缺血再灌注损伤、缺血性心脏病、心力衰竭、心肌病等[1]。近年来,关于微小RNA(microRNA,miRNA)调控心肌细胞凋亡的研究已成为热点,为心脏疾病的诊治提供了重要方向[2]。本研究将miR-1 mimics、miR-499 inhibitor转染至H2O2处理的心肌细胞,探讨miR-1与miR-499在心肌细胞增殖与凋亡过程中的调控作用及其机制,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料来源
大鼠H9C2心肌细胞株,购自中科院上海细胞库;胎牛血清、DMEM培养基、0.05%胰酶/EDTA(美国Hycloneo公司);miR-1 mimics、miR-499 inhibitor、竞争性短核糖核苷酸阴性对照序列(scramble-NC)、miR-499、miR-1和U6引物序列(上海吉凯基因化学技术有限公司);H2O2、CCK-8、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(中国碧云天试剂公司);β-actin、Bim、Mcl-1单抗(美国Epitmics公司);ECL化学发光试剂盒(美国millipore公司);脂质体2000转染试剂(美国Invitrogen公司);二喹啉甲酸(BCA)试剂盒(美国Thermo公司);miRNeasy Serum/plasma Kit、miScript SYBR Green PCR Kit、RNase-free ddH2O、逆转录试剂盒(德国QIAGEN公司) ......
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