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编号:13831042
三氧化二砷对肝癌细胞顺铂化疗敏感性的调节作用(2)
http://www.100md.com 2020年7月5日 《中国现代医生》 202019
     1 材料与方法

    1.1 细胞系

    人肝细胞肝癌HepG2 购自上海细胞库。

    1.2 主要试剂

    胎牛血清、L-谷氨酰胺、二甲基亚砜、5%BSA封闭液、MTT试剂盒和三氧化二砷购自美国Sigma公司,DMEM-F12培养基、0.25%胰蛋白酶、10 000 U/mL青霉素/10 000 U/mL链霉素购自美国Gibco公司,细胞培养皿及培养板购自美国Coming公司,Annexin Ⅴ凋亡试剂盒购自德国Miltenyi Biotec公司。

    1.3 方法

    1.3.1 MTT法检测细胞增殖率 将常规培养的HepG2肝癌细胞株制成细胞悬液,调整浓度为2×105个/mL,接种于96孔板,每孔100 μL。将对照组、联合组和CDDP组的HepG2细胞分别用生理盐水、5 μM的ATO 联合20 μM 的CDDP和单独20 μM 的CDDP 处理48 h后终止培养,用PBS清洗3次,加入10 μL MTT溶液,37℃,避光孵育2 h。以酶标仪测定450 nm波长处的吸光度(OD)值(A值)。

    1.3.2 细胞凋亡检测 将常规培养的HepG2肝癌细胞株制成细胞悬液 ......
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