徐玮 邵颖颖 杜二球

    [摘要] 目的 探討氯氰菊酯对青春期雄性大鼠生殖系统的影响及相关机制。 方法 随机将40只SD健康青春期雄性大鼠分为正常组和低、中、高剂量组各10只，四组大鼠分别进行干预。采用RT-PCR法检测miR-409b、miR-30b-3p表达，检测各组大鼠生殖系统重量，检测精子生成、存活情况，采用免疫透射比浊法检测性激素、氧化应激指标水平。 结果 高剂量组miR-409b、miR-30b-3p表达、精囊重量高于低、中剂量组(P0.05)，具有可比性。取氯氰菊酯，使用玉米油配置20、40、60 mg/kg氯氰菊酯溶液，分别对低、中、高剂量组大鼠灌胃处理，连续处理15 d，正常组大鼠使用生理盐水灌胃处理，连续处理15 d。

    1.2.2 检测方法? ①采用RT-PCR法检测miR-409b、miR-30b-3p表达。取各组大鼠腹部静脉血3 mL，使用2000 r/min离心机(湖南凯达科学仪器有限公司，型号：KL05R)离心处理15 min后-40℃保存。取TRIzol试剂(广州济恒医药科技有限公司)添加至血清标本，静置15 min后添加600 μL三氯甲烷进行搅拌，直至混合溶液颜色变为乳白色，将其置于4℃环境保存15 min后取出进行离心处理，取上清液，等量添加异丙醇后再次离心处理，1 mL 75%乙醇洗涤后提取总RNA，测试完整性，合成cDNA，逆转录处理后行PCR扩增，2-△△Ct方法计算微小RNA-409b(miR-409b)、微小RNA-30b-3p(miR-30b-3p)表达 ......