殷杰 赵胜利 蔡晓明 袁辉宗 李俊杰 竺枫

    [摘要] 目的 分析基于無翅型MMTV整合位点家族(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路，血管内皮生长因子(VEGF)基因转染骨髓源内皮祖细胞(EPCs)移植对大鼠缺血皮瓣的治疗作用。 方法 培养诱导分化大鼠EPCs，脂质体介导VEGF转染EPCs。Wistar大鼠制备缺血皮瓣模型分为对照组、VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、Wnt/β-catenin信号通路激活剂氯化锂(LiCl)组。VEGF-EPCs组与NC-EPCs组皮瓣分别注射PcDNA3.1(+)/VEGF165质粒、PcDNA3.1(+)/NC空载对照质粒，对照组注射PBS溶液，LiCl组注射LiCl。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清VEGF水平;观察大鼠皮瓣存活情况;激光多普勒血液检测仪检测皮瓣蒂部血流;HE染色计算皮瓣毛细血管密度;Western blotting检测皮瓣组织Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。 结果 镜下观察分离培养的EPCs外观呈“铺路石”状，经鉴定符合EPCs表面抗原。VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、LiCl组血清VEGF水平、皮瓣存活率、PU值、毛细血管密度高于对照组，且VEGF-EPCs组高于NC-EPCs组、LiCl组，差异有统计学意义(P<0.05)，NC-EPCs组与LiCl组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF-EPCs组、NC-EPCs组、LiCl组β-catenin、c-myc蛋白相对表达量高于对照组，LiCl组高于VEGF-EPCs组与NC-EPCs组，VEGF-EPCs组高于NC-EPCs组，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 VEGF基因转染骨髓源EPCs移植能促进大鼠缺血皮瓣的存活，改善血液循环，增加微血管密度，其机制与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关 ......