刘洪福 林森海 赵华丽 张蕾 余年发 曾翔辉 刘宇一 曾祥福

    [摘要] 目的 探討miR-192与胃癌患者幽门螺旋杆菌(Hp)感染的关系并分析其对细胞增殖的影响及机制研究。方法 收集2019年7月至2021年4月赣南医学院第一附属医院收治的胃癌患者50例作为GC组，选取同期行胃镜检查的浅表性胃炎患者50例作为对照组。采用尿素酶法检测Hp感染，RT-PCR检测miR-192的表达，分析Hp+胃癌患者miR-192表达与胃癌临床病理特征的关系。在Hp+ MKN-45细胞中转染miR-192模拟物、miR-192抑制物及无关对照(NC)，并将细胞分为Inhibitor组、Mimics组和NC组。MTT法检测细胞增殖，荧光素酶报告基因验证miR-192与P53基因的靶向关系，Western blot检测P53蛋白表达。结果 胃癌患者Hp+率(74.00% vs. 32.00%)显著高于对照组(P2=0.170，P=0.680)、年龄(t=-0.101，P=0.920)比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经赣南医学院第一附属医院医学伦理委员会批准。

    1.3 菌株和细胞

    Hp菌株购自ATCC，人胃癌细胞系MKN-45购自协和细胞库。细胞常规培养于RPMI-1640培养基中，待密度至80%左右，以100∶1的倍数与Hp共培养。24 h后提取总RNA;将Hp+MKN-45细胞接种于6孔板转染miR-192 inhibitor、miR-192 mimics或miR-192 NC，将其分为Inhibitor组、Mimics组和NC组 ......