circ_ACAP2 对胃癌细胞BGC-823 增殖凋亡的影响及作用机制
萤光,细胞株,试剂盒,1材料与方法,1主要试剂及仪器,2细胞培养,3检测方法,4统计学方法,2结果,1circ_ACAP2,miR–488–3p,FSCN1在胃癌细胞中的表达,2抑制ci
郑炜智 刘炳辉 杨继洲 盛玲玲 付承林1.台州市第一人民医院病理科,浙江台州 318020;2.台州市第一人民医院检验科,浙江台州 318020
胃癌在胃肠道恶性肿瘤中较为常见,具有较高发病率,且发病较为隐匿,早期检出率较低,多数患者发现时已为晚期,临床预后较差。采用放化疗对患者治疗,可使临床治疗效果得到改善,但因患者对化疗药物具有一定的耐药性,可增加患者复发、转移风险。环状RNA 结构较为保守、稳定,且特异性较高,表达于患者血液、唾液,可用于肿瘤的诊断、评估。环状RNA–ACAP2(circular RNA–ACAP2,circ_ACAP2)在直肠癌、乳腺癌中高表达,且随着淋巴结的转移逐渐升高。miRNA 为非编码RNA,miR–488–3p 为肿瘤抑制因子,低表达于胃癌患者,其表达升高可抑制胃癌的发展。肌成束蛋白(fascin–1,FSCN1)高表达于肿瘤细胞,且参与肿瘤的预后、分期,可对多种肿瘤细胞的增殖能力进行调控,并参与其淋巴结转移、分化。因此,本研究分析circ_ACAP2通过调控miR–488–3p/FSCN1通路对胃癌的增殖、侵袭、转移作用机制,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 主要试剂及仪器
人胃癌细胞株(BGC–823)、人胃上皮细胞(human gastric epithelial cells,GES–1)购自上海机纯实业有限公司;DMEM 完全培养液购自上海西唐生物科技有限公司;四甲基联苯胺(Tetramethyl benzidine,TMB)溶液购自上海古朵生物科技有限公司;pcDNA、pccirc_ACAP2、anti–miR–NC、anti–miR–488–3p、si–NC、si–circ_ACAP2、miR–NC、miR–488–3p均购自上海GenePharma 公司;细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B 细胞淋巴瘤–2(B–cell lymphoma–2,Bcl–2)、p21、Bcl–2 相关性蛋白X(Bcl–2–correlation protein X,Bax)、GAPDH 抗体购自上海西唐生物科技有限公司。培养箱(型号:INA–32–8)购自北京乾明基因技术有限公司;电化学发光试剂盒购自上海邦景实业有限公司;全蛋白提取试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司;四甲基偶氮唑盐(tetramethylazo salt ......
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