张国翠，王建，劳海黎，张盟，孟庆捷

    微阵列芯片技术在耐多药结核病临床诊断中的应用研究

    张国翠，王建，劳海黎，张盟，孟庆捷

    滨州市中心医院检验科，山东滨州 251700

    探讨微阵列芯片技术在耐多药结核病(multidrug resistant tuberculosis，MDR-TB)临床诊断中的应用。收集2020年6月至2021年5月经滨州市中心医院确诊的245例住院肺结核患者的标本(痰液标本125例和痰培养分离菌株120例)。痰液标本同时采用DNA微阵列芯片技术和传统培养法检测其结核杆菌阳性率。痰液标本和分离菌株均采用DNA微阵列芯片技术进行肺结核耐多药检测和分枝杆菌菌种鉴定。125例痰液标本经DNA微阵列芯片技术和痰培养法检测，阳性率分别为58.4%(73/125)和24.8%(31/125)，两种方法比较差异有统计学意义(2=14.520，1 资料与方法

    1.1 标本来源

    收集2020年6月至2021年5月经滨州市中心医院确诊的245例住院肺结核患者的标本(痰液标本125例和痰培养分离菌株120例)。纳入标准：符合《肺结核诊断 WS 288—2017》中诊断标准；有肺结核典型临床症状；经影像学检查，肺部有活动性肺结核病变。排除标准：合并其他肺部疾病；精神异常患者。纳入患者中男127例，女118例，年龄18～76岁，平均年龄46.9岁。所有患者均签署知情同意书，本研究经滨州市中心医院内部伦理委员会批准(伦理审批号：2020005)。

    1.2 试剂和仪器

    晶芯?结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒(DNA微阵列芯片法)和晶芯分枝杆菌菌种鉴定试剂盒(DNA微阵列芯片法)购自博奥生物技术有限公司。使用仪器有ABI500荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)仪；晶芯?E-Cycler?96 PCR仪；晶芯?BioMixer?Ⅱ芯片杂交仪；晶芯?SlideWasher?芯片洗干仪；晶芯?LuxScan?10K/B微阵列芯片扫描仪等。

    1.3 方法

    125份合格痰液标本取半量(约2.5ml)加入两倍体积4%NaOH溶液，震荡15min，取0.1ml液化痰液接种酸性罗氏培养基中，37℃孵育，4周报告结果，操作按《分枝杆菌分离培养标准化操作程序及质量保证手册》[5]要求；剩余半量(约2.5ml)痰液标本加入两倍体积4%NaOH溶液 ......