马权，陈永良，王楷峰，田伟

    基于NK细胞亚群与调节性T细胞的前列腺癌风险评估研究

    马权，陈永良，王楷峰，田伟

    绍兴市中心医院泌尿外科，浙江绍兴 312000

    探讨自然杀伤(natural killer，NK)细胞亚群和调节性T(regulatory T，Treg)细胞在前列腺癌患者外周血中的表达及其与前列腺癌的关系。选取2020年9月至2022年2月绍兴市中心医院收治的51例前列腺癌患者作为观察组，52例同期健康体检者作为对照组。采用流式细胞术检测两组患者外周血中NK细胞亚群和Treg细胞比例，分析不同TNM分期和Gleason评分的前列腺癌中NK细胞亚群、Treg细胞表达差异及相关性。观察组CD56brightCD16-、CD56dimCD16+明显小于对照组(1 资料与方法

    1.1 临床资料

    收集2020年9月至2022年2月绍兴市中心医院收治的51例前列腺癌患者作为观察组，52例同期健康体检者作为对照组，纳入标准：①经前列腺穿刺活检确诊为前列腺癌；②在检查前未接受过前列腺癌相关治疗。排除标准：①伴有急性或慢性炎症；②患自身免疫性疾病或接受过免疫调节类药物；③患有其他恶性肿瘤；④临床资料不完整。本研究经绍兴市中心医院伦理委员会审核批准(伦理审批号：2023伦审论第004号)，研究对象均签署知情同意书。

    1.2 方法

    观察组患者穿刺前抽取新鲜外周血，对照组人群体检时空腹抽取新鲜外周血，两组均以乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetie acid，EDTA)抗凝。流式细胞仪：NovoCyte 2060R[安捷伦生物(杭州)有限公司]、DiagCyto[科技(浙江)有限公司]。检测试剂：CD3、CD4、CD16、CD25、CD56、CD127检测试剂及溶血素[科技(浙江)有限公司]。取抗体(不同项目加入不同抗体)加入流式管中，将混匀后的EDTA抗凝血样本置于流式管底部，低速涡旋混匀，室温下避光孵育15min。加入2ml(1×)UB Lysis solution置于流式管中，低速涡旋混匀，室温下避光孵育15min。室温下300×离心5min，弃去上清，加入2ml磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline，PBS)，低速涡旋混匀。室温下300×离心5min，弃去上清，加入500μl 1%多聚甲醛。上机检测，如无法立即检测，将样本放置在2～8℃下避光储存(在细胞收获/染色/裂解程序的24h内完成)，上机检测前涡旋混匀 ......