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编号:666397
大豆皂苷调控miR-584-5p/HDAC1通路对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡的影响
http://www.100md.com 2023年12月15日 中国现代医生 2023年第33期
抑制剂,活力,1材料与方法,1试剂与细胞,2主要仪器,3HEC-1-A细胞培养并检测半数抑制浓度,4细胞分组处理及样品收集,5各组细胞增殖检测,6各组细胞凋亡检测,7各组细胞mi
     帅仁亚,李晴宇,范敏慧,徐炜

    1.杭州市肿瘤医院药学部,浙江杭州 310002;2.杭州市第一人民医院吴山院区药学部,浙江杭州 313000;3.杭州市肿瘤医院中西医结合肿瘤科,浙江杭州 310002

    子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)近年来发病率逐年增高,对广大女性健康造成极大威胁[1-2]。组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase1,HDAC1)属于一种致癌因子,与肿瘤的发生和发展密切相关,在肝细胞癌、乳腺癌、子宫内膜肿瘤等多种肿瘤组织及细胞中呈强阳性表达,下调其表达可显著抑制肝癌、乳腺癌与神经母细胞瘤细胞增殖,发挥很好的抗癌活性[3-4]。研究发现,微小RNA-584?5p(microRNA-584?5p,miR-584?5p)是一种具有抑癌活性的微小RNA,在髓母细胞瘤、非小细胞肺癌和胃癌等癌组织中低表达,上调miR?584?5p 表达可显著抑制非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭,诱导髓母细胞瘤细胞DNA 损伤和凋亡,这表明miR-584-5p/HDAC1 通路可作为潜在的EC 治疗靶点[5-7]。大豆皂苷具有抗癌、增强免疫力等药理功效,可减轻肿瘤耐药及血管新生,抑制癌细胞增殖并促使其凋亡,发挥较强的抗肿瘤作用,因而推测大豆皂苷可防治EC[8-9]。本研究通过体外培养EC 细胞系HEC-1-A,探讨大豆皂苷调控miR-584-5p/HDAC1通路对EC 细胞增殖及凋亡的影响。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与细胞

    人EC 细胞系HEC-1-A(武汉普诺赛生命科技有限公司);大豆皂苷[纯度高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)≥98%,批号:51330-27-9,上海吉至生化科技有限公司];高效放射免疫沉淀测定(radio-immune precipitation assay,RIPA)裂解液、总RNA 提取试剂盒、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白浓度测定试剂盒、实时聚合酶链反应主混合物(SYBR green real time PCR master mix)、细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK-8)、逆转录试剂盒、膜联蛋白-V(annexin V)-荧光素异硫氰酸酯(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidine iodide,PI)凋亡检测试剂盒、DMEM 培养基(含双抗)、LipofectamineTM2000、优级胎牛血清(北京索莱宝科技有限公司);兔源B 淋巴细胞瘤-2 相关X 蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein ......

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