荧光定量PCR技术用于食品肉类种源掺假鉴定
在国内及国际贸易中,我国肉制品掺杂、以次充好的欺骗行为屡见不鲜,严重损害了消费者的利益,并且对我国出口肉制品在国际市场上的声誉造成损害。要杜绝这些掺杂使假的现象,关键手段是要建立一种能快速准确鉴别动物种源成分的检测方法,为上述产品的质量做本质上的把关,提高执法的科学性和高效性,进一步提高检验检疫通关速度。因此,建立一种快速、灵敏、特异的检测肉类种源的检测方法一直是有待解决的难题。目前,动物源性成分鉴别的主要方法有物理、化学、免疫学和分子生物学方法。
物理学鉴别方法常用镜检法,通过观察来区分禽类、哺乳动物和鱼类,但该方法本身却并不能区分动物的种类。在检测的过程中,需要有经验的检验员进行操作,可以定量检测0.1%以下的骨片段。
化学方法进行动物源性分析主要有色谱法和光谱法两种,但是化学方法的样品制备比较复杂,检测仪器相对较贵,无法分析高度处理过的样品。
免疫学方法以检测蛋白质为基础,主要有同工酶检测、酶联免疫吸附分析(ELISA)以及电泳方法等,但其由于缺乏较高重现性和灵敏度以及受样品性质影响而受到限制。免疫学鉴别方法主要用于鉴别粗加工肉类的动物种类,只有少数的方法可以用于检测蒸煮肉类的蛋白质,因此很多的免疫学鉴别方法都不能用于热处理肉品。
分子生物学方法主要有常规PCR、多重PCR、实时荧光PCR等,同时DNA杂交技术、PCR-电泳、PCR-限制性片段长度多态分析技术、随机引物的扩增法、环介导等温扩增技术、DNA基因检测手段式PCR技术等也是目前发展较为领先的几种分子生物学方法 ......
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