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编号:13416373
食源性致病微生物阪崎肠杆菌核酸检测试剂盒的研究
http://www.100md.com 2019年8月1日 《食品安全导刊》 2019年第8期
     食品安全问题一直是社会各界关注的重点。世界卫生组织曾报道称,食源性疾病是受全球关注的卫生问题,更是影响人类健康的重要因素,而病原微生物感染则是导致食源性疾病发生的主要因素。阪崎肠杆菌在2002年被国际食品微生物标准化委员会(ICMSF)确定为食源性致病菌,如被阪崎肠杆菌感染可能会引起婴幼儿尤其是新生儿患病,如脑膜炎、菌血症及坏死性小肠结肠炎等,更有甚者会引起严重的后遗症或死亡。有数据显示,目前只有婴幼儿奶粉与这一疾病的爆发相关。

    传统的致病微生物检测方法有国标法和纸片法,但因操作复杂且测试周期过长,其已经无法跟上经济发展的步伐,不能满足我国快速发展的食品行业对食品检测工作的需求。因此,建立一种在婴幼儿奶粉中快速、高效、灵敏的检测阪崎肠杆菌的方法至关重要。

    本研究是一种基于环介导等温扩增技术而开发的快速检测食品中阪崎肠杆菌的方法。环介导等温基因扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplification,以下简称“LAMP法”)是日本荣研株式会社研究发明的核酸等温扩增方法,其利用4个特殊的引物特异识别靶基因的6个特定区域,采用具有强链置换活性的BstDNA聚合酶,实现在恒温条件下的体外扩增。本研究根据阪崎肠杆菌的16-23S基因设计了6条引物,并将其与目的基因的6个区域相结合,具有特异性强、灵敏度高的优点。本试剂盒能在60min内完成扩增反应 ......

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