3.4 产孢培养条件的优化

    以3.3中得到的最优培养基组分为基础，进行发酵条件(温度、时间、接种量)优化。通过单因素实验对产孢条件进行实验优化，分别设置实验条件因素如下：

    ①培养温度分别设置为55、60、65、70、75℃；

    ②培养时间分别设置为16、20、24、32、36、40h；

    ③接种量分别设置为0.03%、0.06%、0.1%、0.2%、0.4%。

    通过芽孢染色和显微镜镜检的方法估算芽孢产率，以芽孢产率为指标，重复3次实验，确定最佳产孢条件。

    3.5 优化后条件的验证

    对经过3.3和3.4实验优化所得到的最优条件进行组合，进行5次芽孢发酵实验，对芽孢产率进行验证。

    4结果与分析

    4.1 培养基营养成分的确定

    4.1.1蛋白胨浓度的确定

    依照3.3的实验方案，以最初培养基组成比例为基础，更改蛋白胨的含量分别为0.5%、0.8%、1.0%、1.2%、1.5%、1.8% ......