□ 严开芹 曾小平 向君毅 广东省清远市食品检验中心

    1 引言

    茶多酚和生物碱是茶叶中重要的活性成分，儿茶素是茶多酚的主要成分，占茶多酚含量的60%～80%，也是主要的药理活性物质，具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖等作用[1-4]，其中儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EG C)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与表儿茶素没食子酸酯(ECG)是影响茶叶品质和质量的重要指标，国家标准[5]对绿茶中以上5种儿茶素的含量进行了规定。咖啡因是生物碱的主要组成成分，是茶叶重要的风味物质和生理活性成分，具有消除疲劳、兴奋神经的作用[6]，但人体过量摄入会产生不良影响[7]，同时，咖啡因也是影响茶叶品质的重要指标，因而建立一种快速测定茶叶中儿茶素类和咖啡因的检测方法很有必要。

    目前，国家标准和文献报道的儿茶素类和咖啡因的检测方法主要为高效液相色谱法(HPLC)[8-12]，但国家标准和一些文献报道的方法存在流动相复杂[13]、分析时间长和缺少样品净化步骤[14-15]等问题。而茶叶样品基质复杂，除茶多酚和生物碱外，还含有色素、蜡质等成分，这些成分不仅影响儿茶素类和咖啡因的检测效果，还容易在色谱柱上残留，造成柱压升高、色谱柱污染、柱效降低等问题，影响仪器的后续使用；有些文献报道了基于固相萃取的前处理净化方法[16]，但该前处理方法存在商品化小柱价格昂贵、处理时间长、不能批量处理等缺点。而QuEChERS作为一种较新的前处理方法，具有快速、简单、便宜、有效、可靠和安全的特点，其原理是利用吸附剂与基质中的杂质的相互作用，吸附杂质从而达到除杂净化的目的。本文针对国家标准和文献中检测儿茶素和咖啡因方法存在的缺陷，首次采用QuEChERS方法结合HPLC，建立了茶叶中儿茶素类和咖啡因的检测方法，此方法具有操作简单、准确性高、流动相系统简单与分析时间短的优点，并能满足分析的要求，能够为茶叶的等级评价和质量控制提供更准确的科学数据。

    2 材料与方法

    2.1 材料与仪器

    儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没 食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)与咖啡碱(CAF)购于中国广州分析测试中心(规格均为20 mg/盒)；甲醇(色谱纯)，迪马公司；乙二胺-N-丙基硅氧烷(PSA)、十八烷基硅烷(C18)、氧化铝(Al2O3)、石墨化炭黑(GCB) ......