摘 要：本文旨在建立实时荧光PCR检测熟牛肉中牛、猪、马等动物源性成分的方法。通过对菏泽市市售熟牛肉进行采样检测，提取熟牛肉中总DNA后进行实时荧光PCR检测，确定Ct值，分析样品熟牛肉中牛、猪、马源性成分。通过检测DNA提取液(纯度1.6～1.7)，便能满足实时荧光PCR的检测要求。本次采样检测的12批样品中，2批既检出牛源性成分又检出马源性成分，说明样本可能存在马肉掺假为牛肉的问题。

    1 引言

    随着社会的发展，人们的生活水平不断提高，对肉制品的要求也越来越高。但是，肉制品市场存在肉类掺假、以次充好等欺骗消费者的行为，不法商贩为了追求自身利益以“挂羊头卖狗肉”的方式用劣质肉冒充高质量的肉制品。利用常规的检测方法只能从感官及形态上鉴别肉类，无法从溯源层面解决肉类掺假的问题，例如对于腌制加工的熟牛肉，消费者就很难通过肉眼辨别其是否为牛肉。

    随着分子生物学的发展，以DNA为基础的PCR技术被广泛应用于动物源性成分的检测[1-4]，即聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)溯源是以DNA遗传物质为基础鉴别肉及肉制品。聚合酶链式反应是一种在体外特异性扩增DNA序列的技术 ......