食用植物油中苯并(a)芘检测过程中的空白来源分析
摘 要：笔者对2019年陕西省榆林市监督抽检的80批次食用油中苯并(a)芘的檢测结果进行分析，采用GB 5009.27-2016进行测定并对实验中的空白来源进行了分析。通过对照实验发现，实验中的空白干扰主要存在于实验中使用的溶剂二氯甲烷、正己烷、氮吹过程，以及重复使用的离心管，希望以此为实验人员的检测提供更多参考。
关键词：苯并(a)芘 监督抽检 数据分析 空白干扰
1 苯并芘简介
苯并(a)芘，又名3，4-苯并芘，是一种芳烃类化合物，为有机物在高温缺氧条件下发生热裂解或热合成反应的产物[1]，对人或动物有着强烈的致癌作用。在2017年10月27日世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中，苯并(a)芘被列为一类致癌物，其可诱发皮肤、肺和消化道癌变[2]。长期大量食用苯并(a)芘超标的食品，会对人体健康产生较大危害。因此，对食用植物油中的苯并(a)芘进行风险评估和风险监测十分重要[3]。
1.1 苯并(a)芘的性质
苯并(a)芘是一种多环芳烃，不溶于水，微溶于乙醇、甲醇，溶于苯、甲苯、二甲苯、氯仿、乙醚、丙酮等，常温下性质稳定。目前已发现的有致癌作用的多环芳烃约20种，其中苯并(a)芘是污染最广、最有代表性的致癌物之一，更是一种高活性致癌剂。苯并(a)芘的动物试验包括经口、经皮、吸入，以及腹膜皮下注射，均出现致癌现象。许多国家相继用9种动物进行实验，并采用多种给药途径，结果都得到苯并(a)芘诱发癌症的阳性报告。
1.2 国内外关于食用植物油中苯并(a)芘的限量规定
由于苯并(a)芘的强烈致癌性，很多国家、地区及组织对食用油中的苯并(a)芘限量都有着严格要求：欧盟208/2005号文件对食用油中苯并(a)芘的最大限量规定为2μg/kg;西班牙、葡萄牙、希腊和意大利等国家也规定食用油脂中的苯并(a)芘最大限量为2μg/kg，并限定了包括苯并(a)芘在内的8种芳烃类化合物的总量不得超过5μg/kg[4];国际食品法典委员会规定食用油中的苯并(a)芘最大限量为5μg/kg;我国《食品安全国家标准 食品中污染物限量》(GB 2762-2012)中规定油脂及其制品中的苯并(a)芘最大限量为10μg/kg。
2 2019年监督抽检食用植物油中苯并(a)芘检测数据分析
2.1 检测结果分析
2019年，陕西省榆林市食品检验检测中心共抽检了80批次食用植物油中的苯并(a)芘，其中，不合格样品共1批次。被抽检样品中，9批次未检出苯并(a)芘;71批次检出苯并(a)芘，平均值为2.9μg/kg;检出结果为5μg/kg以上的样品共12批次，检测数据分布情况如图1。
2.2 空白来源分析
苯并(a)芘检测实验采用GB 5009.27-2016标准实验方法。具体实验过程为，称取0.4g油脂试样于50mL离心管中，加入5mL正己烷，旋涡混合0.5min，待净化。采用苯并(a)芘分子印迹柱，依次用5mL二氯甲烷及5mL正己烷活化柱子。将待净化液转移进柱子，待液面降至柱床时，用6mL正己烷淋洗柱子，弃去流出液。用6mL二氯甲烷洗脱并收集净化液到刻度试管中。将净化液于40℃氮气吹干，准确吸取0.4mL乙腈涡旋复溶0.5min，过微孔滤膜后供液相色谱测定。流动相采用乙腈+水=88+12。
在对苯并(a)芘检测的过程中发现，空白实验总能检出数值，且每次实验空白值不一致。分析实验过程后，笔者认为空白干扰可能存在几方面因素：前处理过程(氮吹、过柱)、试剂干扰(乙腈、二氯甲烷、正己烷)、器皿残留(离心管)。为了找出空白干扰因素，笔者设计了一组对照实验，实验设计如表1。
为了减少实验干扰因素，本实验中使用的刻度试管均为新的玻璃刻度试管。由于实验中使用的流动相是乙腈+水，因此认为乙腈中不含目标物。图2为实验6的色谱图，而实验6的结果表明，苯并(a)芘分子印迹柱中不存在苯并(a)芘，且乙腈与新的玻璃刻度试管中也不存在苯并(a)芘。由于实验6中证明苯并(a)芘分子印迹柱中不含目标物，故对比实验1、2可知，二氯甲烷中含有苯并(a)芘。
图3分别为实验1、3的色谱图，通过对比实验1、3可知，氮吹过程中会引入苯并(a)芘，这可能与氮吹反复使用过程中针管被污染有关，但是氮吹的干扰较小。
图4中，左为二氯甲烷过柱氮吹后上机的色谱图，右为正己烷过柱氮吹后上机的色谱图。结合实验1、3的检测结果来看，氮吹导致的KB中苯并(a)芘浓度增加为0.070ng/mL，而实验4的检测结果为0.253ng/mL，实验5的检测结果为0.256ng/mL，显然大于氮吹引起的干扰，故认为实验中使用的二氯甲烷和正己烷中含有苯并(a)芘。
图5中，左为实验2正己烷通过离心管转移后氮吹上机测定结果，右为实验4未通过离心管转移直接氮吹上机测定结果，对比实验2、4结果可知，离心管也存在被苯并(a)芘污染的情况。
综合以上分析结果可知，苯并(a)芘分子印迹柱不存在空白干扰，乙腈中不含有苯并(a)芘。本实验中使用的二氯甲烷和正己烷中含有少量苯并(a)芘，且氮吹过程会代入苯并(a)芘，重复使用的离心管也会代入苯并(a)芘，从而对分析结果产生干扰。
3 结论
本文通过对2019年食用植物油中苯并(a)芘的检测结果进行分析，对数据分布情况进行统计并分析实验中的空白干扰因素发现，实验中使用的二氯甲烷、正己烷、氮吹，以及重复使用的离心管均会对实验结果造成干扰，因此在苯并(a)芘检测的最终结果计算中扣除空白值非常必要。
参考文献：
[1] 王敏.大豆油苯并(a)芘检测与调控研究[D].天津：天津科技大学，2013.
[2] 杨水艳，邵志凌.食用油中苯并(a)芘分析方法的最新研究进展[J].粮油加工，2014，02：43-46.
[3] 彭志兵，莫逆，杨学文.食用油中苯并(a)芘分析方法研究进展[J].粮油食品科技，2013，21：46-49.
[4] MORET S，PURCARO G，CONTE L S.Polycyclic aromatic hydrocarbons in vegetable oils from canned foods [J].Eur J Lipid Sci Tec，2005，107：488-496., 百拇医药(贺亚如 李月月 磨家佳)
关键词：苯并(a)芘 监督抽检 数据分析 空白干扰
1 苯并芘简介
苯并(a)芘，又名3，4-苯并芘，是一种芳烃类化合物，为有机物在高温缺氧条件下发生热裂解或热合成反应的产物[1]，对人或动物有着强烈的致癌作用。在2017年10月27日世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中，苯并(a)芘被列为一类致癌物，其可诱发皮肤、肺和消化道癌变[2]。长期大量食用苯并(a)芘超标的食品，会对人体健康产生较大危害。因此，对食用植物油中的苯并(a)芘进行风险评估和风险监测十分重要[3]。
1.1 苯并(a)芘的性质
苯并(a)芘是一种多环芳烃，不溶于水，微溶于乙醇、甲醇，溶于苯、甲苯、二甲苯、氯仿、乙醚、丙酮等，常温下性质稳定。目前已发现的有致癌作用的多环芳烃约20种，其中苯并(a)芘是污染最广、最有代表性的致癌物之一，更是一种高活性致癌剂。苯并(a)芘的动物试验包括经口、经皮、吸入，以及腹膜皮下注射，均出现致癌现象。许多国家相继用9种动物进行实验，并采用多种给药途径，结果都得到苯并(a)芘诱发癌症的阳性报告。
1.2 国内外关于食用植物油中苯并(a)芘的限量规定
由于苯并(a)芘的强烈致癌性，很多国家、地区及组织对食用油中的苯并(a)芘限量都有着严格要求：欧盟208/2005号文件对食用油中苯并(a)芘的最大限量规定为2μg/kg;西班牙、葡萄牙、希腊和意大利等国家也规定食用油脂中的苯并(a)芘最大限量为2μg/kg，并限定了包括苯并(a)芘在内的8种芳烃类化合物的总量不得超过5μg/kg[4];国际食品法典委员会规定食用油中的苯并(a)芘最大限量为5μg/kg;我国《食品安全国家标准 食品中污染物限量》(GB 2762-2012)中规定油脂及其制品中的苯并(a)芘最大限量为10μg/kg。
2 2019年监督抽检食用植物油中苯并(a)芘检测数据分析
2.1 检测结果分析
2019年，陕西省榆林市食品检验检测中心共抽检了80批次食用植物油中的苯并(a)芘，其中，不合格样品共1批次。被抽检样品中，9批次未检出苯并(a)芘;71批次检出苯并(a)芘，平均值为2.9μg/kg;检出结果为5μg/kg以上的样品共12批次，检测数据分布情况如图1。
2.2 空白来源分析
苯并(a)芘检测实验采用GB 5009.27-2016标准实验方法。具体实验过程为，称取0.4g油脂试样于50mL离心管中，加入5mL正己烷，旋涡混合0.5min，待净化。采用苯并(a)芘分子印迹柱，依次用5mL二氯甲烷及5mL正己烷活化柱子。将待净化液转移进柱子，待液面降至柱床时，用6mL正己烷淋洗柱子，弃去流出液。用6mL二氯甲烷洗脱并收集净化液到刻度试管中。将净化液于40℃氮气吹干，准确吸取0.4mL乙腈涡旋复溶0.5min，过微孔滤膜后供液相色谱测定。流动相采用乙腈+水=88+12。
在对苯并(a)芘检测的过程中发现，空白实验总能检出数值，且每次实验空白值不一致。分析实验过程后，笔者认为空白干扰可能存在几方面因素：前处理过程(氮吹、过柱)、试剂干扰(乙腈、二氯甲烷、正己烷)、器皿残留(离心管)。为了找出空白干扰因素，笔者设计了一组对照实验，实验设计如表1。
为了减少实验干扰因素，本实验中使用的刻度试管均为新的玻璃刻度试管。由于实验中使用的流动相是乙腈+水，因此认为乙腈中不含目标物。图2为实验6的色谱图，而实验6的结果表明，苯并(a)芘分子印迹柱中不存在苯并(a)芘，且乙腈与新的玻璃刻度试管中也不存在苯并(a)芘。由于实验6中证明苯并(a)芘分子印迹柱中不含目标物，故对比实验1、2可知，二氯甲烷中含有苯并(a)芘。
图3分别为实验1、3的色谱图，通过对比实验1、3可知，氮吹过程中会引入苯并(a)芘，这可能与氮吹反复使用过程中针管被污染有关，但是氮吹的干扰较小。
图4中，左为二氯甲烷过柱氮吹后上机的色谱图，右为正己烷过柱氮吹后上机的色谱图。结合实验1、3的检测结果来看，氮吹导致的KB中苯并(a)芘浓度增加为0.070ng/mL，而实验4的检测结果为0.253ng/mL，实验5的检测结果为0.256ng/mL，显然大于氮吹引起的干扰，故认为实验中使用的二氯甲烷和正己烷中含有苯并(a)芘。
图5中，左为实验2正己烷通过离心管转移后氮吹上机测定结果，右为实验4未通过离心管转移直接氮吹上机测定结果，对比实验2、4结果可知，离心管也存在被苯并(a)芘污染的情况。
综合以上分析结果可知，苯并(a)芘分子印迹柱不存在空白干扰，乙腈中不含有苯并(a)芘。本实验中使用的二氯甲烷和正己烷中含有少量苯并(a)芘，且氮吹过程会代入苯并(a)芘，重复使用的离心管也会代入苯并(a)芘，从而对分析结果产生干扰。
3 结论
本文通过对2019年食用植物油中苯并(a)芘的检测结果进行分析，对数据分布情况进行统计并分析实验中的空白干扰因素发现，实验中使用的二氯甲烷、正己烷、氮吹，以及重复使用的离心管均会对实验结果造成干扰，因此在苯并(a)芘检测的最终结果计算中扣除空白值非常必要。
参考文献：
[1] 王敏.大豆油苯并(a)芘检测与调控研究[D].天津：天津科技大学，2013.
[2] 杨水艳，邵志凌.食用油中苯并(a)芘分析方法的最新研究进展[J].粮油加工，2014，02：43-46.
[3] 彭志兵，莫逆，杨学文.食用油中苯并(a)芘分析方法研究进展[J].粮油食品科技，2013，21：46-49.
[4] MORET S，PURCARO G，CONTE L S.Polycyclic aromatic hydrocarbons in vegetable oils from canned foods [J].Eur J Lipid Sci Tec，2005，107：488-496., 百拇医药(贺亚如 李月月 磨家佳)