贺子轩，沈振，顾伦，柏愚

    海军军医大学第一附属医院消化内科 上海 200433

    结直肠癌是全球范围内发病率排名第三位的恶性肿瘤，也是癌症死亡的第二大病因，每年有近190万新发病例，占癌症总发病人数的9.8%，新发死亡病例近93.5万，占癌症总死亡人数的9.2%[1]。预计到2030年，全球新发结直肠癌病例将超过220万，死亡病例将超过110万[2]。对平均风险人群开展筛查可以降低结直肠癌的发病率和死亡率[3-4]。目前，结肠镜检查是早期诊断结直肠癌最准确的筛查方法，但该方法也存在一定的局限性。首先，与左半结肠相比，右半结肠的病变检出率较低[5-9]。其次，不同内镜医师的结肠镜检查质量参差不齐，导致腺瘤检出率差异很大[10-12]，这在右半结肠中尤为明显[13]。再者，由于饮食限制和侵入性检查，患者对结肠镜检查的依从性较低[14-15]。

    在无创筛查手段中，基于愈创木脂的粪便潜血试验(fecal occult blood test，FOBT)以及检测敏感性更高的粪便免疫化学检测(fecal immunochemical test，FIT)被证实可降低结直肠癌相关的死亡率，但对进展期结直肠腺瘤或早期结直肠癌的诊断敏感性都相对较低[16-17]。此外，有研究表明，近三分之一的结直肠癌由无蒂锯齿状病变(sessile serrated lesion，SSL)演变而来，且多为非出血性，主要发生在右半结肠，因此FOBT和FIT对SSL的诊断价值十分有限[18-19]。

    1 粪便DNA检测技术的建立与发展

    结直肠癌的发生、发展是一个多步骤、多因素、多阶段的过程，其中包括细胞基因组及表观遗传学改变的不断积累[20-22]。在细胞的表观遗传修饰过程中，DNA异常甲基化是肿瘤发生过程中一个早期、常见、稳定的事件，肿瘤细胞脱落进入肠腔并与粪便混合，在粪便中可以检测到极少量的DNA片段，可用以检测肿瘤细胞DNA的异常甲基化[23]。早在1992年，Sidransky等[24]从人类粪便中纯化出DNA，并在结直肠癌患者的粪便中发现了KRAS基因的突变，为建立结直肠癌的无创诊断方式奠定了坚实的理论基础。随后，p53、APC、SPG20、SFRP2等突变基因在粪便中相继被发现并运用于结直肠癌的早期检测。近年来，随着肿瘤分子诊断机制探索的不断深入和粪便DNA检测技术的不断进步，研究人员逐渐认识到，检测粪便中单个基因的突变或异常甲基化并不能准确反映肠道细胞的DNA变异。为了提高检测敏感性，多靶点粪便DNA检测(MT-sDNA)技术应运而生 ......