马 超，欧阳建，郑晓婷，李 平,2，成绍武,2*

    (1.湖南中医药大学中西医结合学院，湖南 长沙 410208；2.中西医结合防治心脑疾病湖南省重点实验室，湖南 长沙 410208)

    毛冬青甲素对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及海马神经元再生的影响

    马 超1，欧阳建1，郑晓婷1，李 平1,2，成绍武1,2*

    (1.湖南中医药大学中西医结合学院，湖南 长沙 410208；2.中西医结合防治心脑疾病湖南省重点实验室，湖南 长沙 410208)

    目的 探讨毛冬青甲素对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)模型大鼠学习记忆能力及神经元再生的影响。方法 选取雄性SD大鼠24只，以Aβ1-42海马注射制作AD大鼠模型，随机分为4组，分别为假手术组、模型组、毛冬青甲素组、阳性药物组(多奈哌齐)。于造模后第3天起开始干预，连续4周。干预结束后进行Morris水迷宫测试，记录各组大鼠水迷宫测试期间逃避潜伏期和空间探索实验中大鼠处于平台所在区间时间比率；用Brdu标记增殖细胞，并采用免疫组织化学法检测各组大鼠海马组织被标记的增殖细胞表达情况，甲苯胺蓝染色法观察海马组织锥体细胞Nissl体形态。结果 Morris水迷宫实验结果表明，与模型组相比，多奈哌齐组、毛冬青甲素组均能缩短潜伏期时间和增加穿越平台次数，改善其学习记忆能力，差异均有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 健康 SD雄性大鼠 24只，体质量180～220 g。由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(湘)2013-0005。

    1.1.2 主要试剂与仪器 毛冬青甲素购自上海榕柏生物技术有限公司；盐酸多奈哌齐片购自金日制药 (中国)有限公司。甲苯胺蓝、Brdu购自北京Solarbio科技有限公司；人源性Aβ1-42购自Sigma公司；兔抗Brdu多克隆抗体购自北京Bioss生物技术有限公司；山羊抗兔二抗和DAB试剂盒购自美国Vector公司。MT-200Morris水迷宫视频跟踪分析测试系统(成都泰盟软件有限公司)；振动切片机(徕卡，Leica VT1000 S)，脑立体定位仪(美国Stoelting公司)，显微镜(蔡司，Primo Star)。

    1.2 方法

    1.2.1 动物分组与AD模型制备 大鼠适应性喂养一周后随机分为4组，分别为假手术组、模型组、毛冬青甲素组、阳性药物组(多奈哌齐)，每组6只。模型组、毛冬青甲素组和阳性药物组大鼠参考相关文献[2]制作Aβ海马注射大鼠模型 ......