大鼠原代卵巢细胞分离后，刚开始接种时颗粒细胞呈球形，10 h 后贴壁生长，培养24 h后，形态不规则，呈多角形或梭形(图1∶5 d)。培养10 d时可铺满皿底，形成单层的颗粒细胞(图1∶10 d)。部分颗粒细胞还出现聚集生长的特征，形成胚胎干细胞样集落。图1显示大鼠卵巢颗粒细胞的原代分离比较成功。

    2.2 PCOS卵巢颗粒细胞模型的构建

    胰岛素对卵巢颗粒细胞的影响，加入不同浓度的胰岛素培养48 h后，收集并裂解细胞，检测其细胞因子发现高浓度胰岛素处理细胞后，会导致PCOS特征性因素葡萄糖相比未加胰岛素对照组明显降低(P<0.05)，雄激素较对照组明显升高(P<0.01)；同时相关炎症因子HMGB1、TNF-α较对照组明显升高(P<0.01)，并激活转录因子NF-kB p65使其磷酸化程度较对照组明顯升高(P<0.05)。由此可见，HMGB1，TNF-α和NF-kB均被胰岛素正向调控，呈现表达量明显上升。显示本实验建立的PCOS细胞模型相对有代表性[6] ......