金水六君煎及其拆方含药血清对A549细胞中黏蛋白MUC5AC及水通道蛋白AQP5表达的影响(3)
1.2.3 细胞分组及干预 取对数期细胞进行实验,分为正常对照组、模型组、金水六君煎组、养阴组和化痰组,每组设3个复孔。黏液高分泌细胞模型制备参考兰箭[9]人中性粒细胞弹性蛋白酶(humanneutrophi lelastase, HNE)诱导法。根据预实验结果采用终浓度为25 nmmol/L HNE,20%含药血清干预细胞。每孔以1×105/mL密度接种于6孔板,加入DMEM培养基+10%FBS,37 ℃、5%CO2培养箱培养24 h至细胞贴壁。去原培养基,加入无血清DMEM培养基,37 ℃、5%CO2培养箱饥饿培养24 h。去培养基,以孔为单位,分为空白组(加入20%空白组大鼠血清)、模型组(加入20%空白组大鼠血清和终浓度为25 nmmol/L HNE)、金水六君煎组(加入20%金水六君煎含药血清和终浓度为25 nmmol/L HNE)、养阴组(加入20%养阴组含药血清和终浓度为25 nmmol/L HNE)、化痰组(加入20%化痰组含药血清和终浓度为25 nmmol/L HNE) ......
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