1.6.3 外周血Treg/Th17细胞频数表达检测 采集大鼠外周血2 mL，加入10 μL的CD4抗体，室温避光孵育20 min;400 r/min速度离心5 min后去掉上清液，再加入2 mL的PBS，混匀，离心，去掉上清液;加入100 μL的IC Fixation buffer，室温避光孵育40 min，加2 mL的1×Permeabilization buffer，离心，去掉上清液;加入IL-17A抗体5 μL，混匀，室温避光孵育40 min;加300 μL PBS混匀避光存放，按照流式细胞分析试剂盒说明书要求和标准规程操作检测。Treg细胞检测使用CD4和FOXP3抗体标记，实验步骤同上。

    1.7 统计学分析

    所有数据采用PSPP17.0进行统计分析处理，计量资料用“x±s”表示，釆用单因素方差分析(One-Way ANOVA)进行多组间比较，进一步两两比较选用LSD-t法检验。P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 一般情况观察

    除正常组外余130 只大鼠在牛血清白蛋白皮下多点注射致敏阶段无死亡，尾静脉注射攻击开始到第5周末共死亡39只 ......