益气解毒方主要三萜类化合物抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖效应的比较(2)
CI=(Rn-Rb)/15其中Rn表示孔接种有细胞时的电极阻抗值,Rb表示孔中只有培养基时的背景阻抗值。根据曲线分析益气解毒方4种三萜类化合物的药效随浓度及时间变化的特征,并计算出合适时间点的半数抑制率(50%inhibiting concentration,IC50的浓度。
1.4.3高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5(C5)监测细胞形态变化待鼻咽癌CNE2细胞生长至70%-80%,胰酶消化后制成单细胞悬液,5000个/孔接种于96孔板,待细胞完全贴壁后,加不同三萜类化合物刺激,通过C5监测细胞生长形态,设定6h拍摄1次细胞形态图像。
1.4.4Western Blot技术检测细胞增殖相关蛋白的表达 根据RTCA和C5结果确定药物处理浓度和时间,待CNE2细胞生长至70%-80%,加不同三萜类化合物,同时设置溶剂对照组(DMSO组),处理一定时间后提取细胞蛋白,测定蛋白浓度后,通过Western Blot检测细胞增殖相关蛋白Survivin、XI-AP、PCNA的表达。
1.5统计学处理
采用SPSS 22.0统计软件进行统计分析,计量资料实验数据用“x±s”表示,多组间计量资料比较采用单因素方差分析,多重比较,方差齐性用LSD检验,方差不齐用Dunnet′s T3检验。P<0.05认为差异有统计学意义 ......
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