取全血标本于室温下静置2 h，1 000 r/min离心 20 min，取上清待测。取单侧睾丸组织剪碎，用4 ℃、0.9%的生理盐水在冰水浴中制成10%的组织匀浆，将匀浆3 000 r/min离心10 min，取上清液。严格按各标本试剂盒说明书进行检测(各试剂盒Elisa酶标仪检测单波长为450 nm)。

    1.5 免疫组化法检测睾丸组织Bcl-2和CytC蛋白表达水平

    取睾丸组织，将固定的标本石蜡切片脱蜡，蒸馏水洗，然后将组织切片置于柠檬酸抗原修复缓冲液(pH 6.0)中进行抗原修复，阻断内源性过氧化物酶后在组化圈内滴加3%BSA室温封闭30 min。然后甩掉封闭液，滴加PBS按一定比例配好的一抗(一抗是山羊来源的用兔血清封闭，其他来源的用BSA封闭)，切片稍甩干后继续滴加与一抗相应种属的二抗(HRP标记)覆盖组织;随即滴加DAB显色液，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，终止显色后用苏木素复染3 min左右，最后脱水封片，用显微镜镜检，图像采集分析。免疫组化平均光密度值(MeanDensity)分析方法：應用Image-ProPlus 6.0软件选取相同的棕黄色作为判断所有照片阳性的统一标准 ...... 如果您在使用手机等流览时无法查看或下载全文，可能是被搜索引擎失真“转码”，请点击屏幕最下方的“电脑版”或“原网页”访问。


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