左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症胎鼠海马神经元NR及mEPSC的影响(3)
2.3 制备含药血清12只SD大鼠,雄性,SPF级,体质量200~220 g,随机分成空白血清组、二甲双胍+氟西汀组、左归降糖解郁方组每组4只。空白血清组灌胃蒸馏水;二甲双胍+氟西汀组用临床等效剂量的二甲双胍(0.18 g/kg)+氟西汀(1.8 g/kg)灌胃;左归降糖解郁方组灌胃给予人临床3倍有效量的左归降糖解郁方溶液(32.82 g/kg),均连续灌胃3 d,2次/d。在最后一次给药1 h后,大鼠腹主动脉采血,静置2 h,离心(10 min,4 500 r/min),取上清液,水浴(56 ℃,30 min),过滤后-80 ℃低温保存。
2.4 分组、造模、干预
将胎鼠海马神经元原代细胞随机分组:空白组、模型组、空白血清组、MK-801组、二甲双胍+氟西汀组、左归降糖解郁方组。培养海马神经元细胞10 d后,根据分组加入高糖溶液(15 μmol/L)、皮质酮溶液(50 μmol/L)。然后,空白组加入10%的培养液,MK-801组于造模后加入10 μmol/L的NR阻断剂溶液(MK-801),空白血清组、二甲双胍+氟西汀组、左归降糖解郁方组分别加入10%的空白血清、二甲双胍+氟西汀含药血清、左归降糖解郁方含药血清 ......
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