散血明目片防控增殖性玻璃体视网膜病变的机制研究(3)
2.4 指标检测2.4.1 眼部B超检查 造模用药后第28天进行术眼的B超检查,观察玻璃体及眼底情况。
2.4.2 免疫组化法检测视网膜及增殖膜中PI3K、Akt、MEK、P38MAPK蛋白表达情况 将眼球标本固定、切片、脱蜡、水化后,按照SP法免疫组化检测系统进行操作。在玻片上作分组标记,防置高倍镜下观察视网膜增殖膜组织中蛋白PI3K、MEK、Akt的表达情况,并随机选取视野,用图像分析仪进行分析统计。
2.4.3 RT-qPCR法检测各组视网膜及增殖膜中PI3K、Akt、MEK、P38MAPK mRNA的表达 从标本中提取RNA后反转录得到cDNA,qPCR引物进行real-time PCR,检测组织中目的基因和内参基因的表达、超微量分光光度计检测RNA浓度与纯度、第一链cDNA合成、RT-qPCR检测最后进行数据分析。用于PCR实验的引物序列见表1。
2.5 統计学处理
采用SPSS 25.0系统软件进行实验数据分析,实验结果所有数据以“x±s”表示。多组比较,若满足正态性和方差齐性 ......
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