将RAW 264.7细胞消化后以每孔1×105个细胞浓度种于6孔板中，培养贴壁。按“2.2”分组给药孵育2 h后除对照组外其它各组均加入LPS使其终浓度为100 ng/mL，每组3个复孔，细胞培养箱中培养，刺激3 h后，收集细胞上清2250×g离心10 min，取上清根据TNF-α ELISA试剂盒说明书进行测量;刺激18 h后，收集细胞上清2250×g离心10 min，取上清根据IL-6 ELISA试剂盒说明书进行测量;刺激24 h后收取细胞上清，2250×g离心10 min，取上清按照NO检测试剂盒(Griess法)说明书进行操作。

    2.6 RT-PCR法检测炎症相关蛋白转录水平

    取对数生长期RAW 264.7细胞消化传代于60 mm细胞培养皿中并按“2.2”分组给药。药物孵育2 h后除正常组外其它各组均加入LPS使其终浓度为100 ng/mL，刺激6 h后，TRAzol法提取细胞总RNA，用Nanodrop紫外分光法检测所提RNA浓度以及纯度并采用琼脂糖水平电泳检测所提RNA完整性[5] ......