祛风明目丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠NLRP3、ASC、IL-1β 表达的影响
造模,1材料与方法,2造模方法,3实验分组及干预,4观察指标和方法,5统计学方法,2结果,1EAU大鼠眼前节变化,2组织病理学检查,3祛风明目丸对房水中NLRP3,IL-1β水
刘溪源,喻京生*1.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208;2.湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙 410007
全球范围内常见的一类高致盲眼病——葡萄膜炎,发病率为17/10 万~52/10 万,致盲率较高,发病率逐年上升[1]。 常见病因包括感染与非感染因素,其中,非感染因素包括自身免疫反应、创伤及理化、氧化损伤、炎症因子释放、遗传因素等,临床大多以自身免疫反应多见[2-5]。 葡萄膜炎的治则主要为散大瞳孔防止粘连、抗炎及消除致病因素,目前,临床常采用中西医结合疗法防治葡萄膜炎,具有较好疗效。中医药虽有确切疗效,但对具体的治疗机制缺乏详细阐述。 本研究团队的前期研究发现,祛风明目丸能够通过多种途径调节机体自身免疫机制,减轻实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis, EAU)大鼠的炎症反应[6-9];有研究证实,祛风明目丸治疗EAU 大鼠是通过上调视网膜组织中Bcl-2 的表达,并抑制Bax、Caspase-3,调节细胞凋亡途径而发挥疗效[10]。 本研究拟通过观察EAU 动物模型中房水及视网膜组织中NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3)、蛋白凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis related spot like protein, ASC)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)的动态变化情况,从细胞凋亡途径,深入研究祛风明目丸治疗EAU 的效果与机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 70 只纯系健康雄性Lewis 大鼠(SPF 级),4~6 周龄,大鼠体质量180~220 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[动物生产许可证号:SCXK(京)2021-0006]。 实验开始前,对70只大鼠双眼进行常规检查以排除眼部病变及全身疾病,剔除患鼠,后进行为期1 周的喂养使其适应环境。 实验室为SPF 级,实验室环境保障:维持室温(24±2) ℃、相对湿度50%~60%、通风情况良好。 所有大鼠均予以常规饲料及动物饮用水喂养。 本实验研究方案及过程均严格遵守湖南省实验动物管理办法,并按相关伦理要求执行(湖南中医药大学第一附属医院伦理委员会审批号:ZYFY20211104-05)。
1.1.2 实验药物 祛风明目丸由熟地黄、当归、川芎、柴胡、鱼腥草、黄芩、菊花、防风、车前子、白芍、丹参构成 ......
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