刘笑蓉，李硕夫，梅文亚，湛 欢，刘平安，周日宝

    1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙 410007；3.湖南省中医药研究院，湖南 长沙 410006

    类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以多关节滑膜炎症增生、骨及软骨破坏为主要特征的一类慢性自身免疫性疾病[1-2]。 该病久治不愈，致残率极高，严重影响患者的生活质量[3-4]。 虽然多种抗风湿药，如细胞因子拮抗剂、B 细胞耗竭药和T细胞共刺激阻滞剂对治疗RA 有一定临床疗效，但RA 患者的死亡率仍然高于普通人群[5]。 因此，探索新的有效和安全的治疗RA 的方法非常重要。

    羊踯躅(Rhododendron Molle G.Don)属杜鹃花科杜鹃花属药用植物，在《滇药录》《畲医药》《瑶药》等书中均有记载。 羊踯躅根提取物炮制后可去除毒性，广泛应用于RA 的临床防治，有较好的治疗效果[6]，同时还能消肿、祛风、止痛及治疗风寒和湿气[7]。目前，对羊踯躅及其有效活性成分抗RA 的药理研究较多，主要集中在药效学研究[8-10]等方面。 然而，羊踯躅治疗RA 的具体作用机制尚未完全阐明。

    本研究通过肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)诱导RA 细胞模型，探究羊踯躅含药血清对TNF-α 处理的RA 成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synovial, RAFLS)增殖和炎症因子分泌的影响和机制，为羊踯躅的临床应用提供科学依据。

    1 方法

    1.1 动物及细胞

    健康SPF 级SD 雄性大鼠30 只，4 周龄，体质量(200±20) g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。 RA-FLS(批号：BS-C1162506)购自上海宾穗生物科技有限公司。

    1.2 主要仪器

    低速离心机(型号：SL02，上海知信实验仪器技术有限公司)；Bio-Tek 酶标仪(型号：MB-530，深圳市汇松科技发展有限公司)；超净工作台(型号：YTCJ-2NB，北京亚泰科隆仪器技术有限公司)；化学发光成像系统(型号：ChemiScope6100，上海勤翔科学仪器有限公司)。倒置生物显微镜(型号：DSZ2000X，北京中显恒业仪器仪表有限公司)；培养箱(型号：DH-160I，上海三腾仪器有限公司)。

    1.3 主要试剂 ......