针刺调控脑缺血再灌注损伤大鼠海马区环状RNA_009775 表达的研究
神经元,1材料,1实验动物与分组,2主要试剂与仪器,2方法,1模型制备,2分组及干预,3神经功能缺损评估,4TTC染色法,5筛选核心共同差异表达circRNA,6qRT-PCR验证,7构建
向 静,江姗姗,唐 红,汪红娟,李展富,王 瑶,谢灿明,田浩梅,陈楚淘*湖南中医药大学针灸推拿与康复学院,湖南 长沙 410208
缺血性脑卒中是因脑动脉阻塞引发脑组织受损或死亡,造成相应功能障碍的一类临床常见疾病。 高发病率、高致死率、高致残率是此病的主要特征[1],对家庭及社会造成了沉重的医疗负担。 恢复局部血供是治疗缺血性脑卒中最有效的手段,然而过程中存在再灌注引发局部损伤及中枢神经系统功能障碍加重的风险[2]。 血流的再通导致脑组织功能不可逆损伤的现象,被称为脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury, CIRI)[3],减轻CIRI是缺血性脑卒中整体治疗方案的重要组成部分。 针刺对CIRI 的疗效已逐步被世界范围内的临床及基础研究证实[4-6],其机制与抑制炎症级联反应、减轻过度氧化损伤、调节细胞自噬等方面密切相关[7],但其微观层面的机制仍有待进一步挖掘。
随着新一代测序技术的发展,非编码RNA 对基因及蛋白质表达水平的关键调控作用引起人们的重视[8]。环状RNA(circularRNA,circRNA)具有区别于其他非编码RNA 的闭环结构,该结构可抵抗RNA外切核酸酶,相较于线性RNA 更稳定、更难以被降解。 此外,circRNA 可充当miRNA 结合位点的竞争性内源RNA(competitive endogenous RNA, ceRNA),间接影响miRNA 与下游mRNA 的结合,在调节基因表达中发挥重要作用[9]。 最近研究表明,相较于其他器官,circRNA 在大脑中高度富集[10],可通过介导血管生成、神经炎症、小胶质细胞活化和氧化应激等多种生物学途径,参与中枢神经系统疾病的发生与进展[11-12],提示circRNA 有望成为治疗CIRI 的新靶点。 本研究拟采用基因芯片检测技术,从circRNA 角度阐释针刺抗CIRI 可能的作用机制,为治疗CIRI 提供新的参考依据。
1 材料
1.1 实验动物与分组
SPF 级雄性SD 大鼠39 只,体质量(230±20) g,由湖南中医药大学实验动物中心提供,动物许可证号:SCXK(湘)2019-0004。 所有大鼠饲养于SPF 级实验动物室,室温24~26 ℃,湿度40%~60%,通风,实验期间自由摄水、进食,适应性饲养1 周。 依照随机数字表法将大鼠分为假手术组、模型组、针刺组,每组13 只。实验已通过湖南中医药大学实验动物福利和伦理委员会审查 ......
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