HBsAg采用胶体金试纸法检测时的漏检情况探讨(1)
[摘要] 目的 探讨HBsAg采用胶体金试法与ELISA酶标法检测时漏检情况比较。方法 选择该站2011年5—10月无偿献血者标本中用国产和进口两种ELISA酶标试剂筛查HBsAg均为阳性的标本185例。行胶体金试法检测，对造成胶体金法漏检的资料进行回顾性分析。结果 ELISA酶标法185例血清标本检测中，HBsAg阳性，男性110例，女性75例。胶体金试纸法185例血清标本检测中，110例男性样品中HBsAg阳性65例，阳性率为59%，漏检率为41%。75例女性样品中HBsAg阳性40例，阳性率为53%，漏检率为47%。男女两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 针对胶体金试纸法检测HBsAg的漏检情况，对于HBsAg浓度较低的标本，胶体金法检测时易出现假阴性造成漏检，需进一步提高胶体金试纸法的灵敏度，降低无偿献血HBsAg阳性的报废率；采用ELISA酶标法，同时在利用ELISA酶标法对HBsAg进行检测时，需应用相关部门提供的血清临界值做质控，以防止漏检发生。
[关键词] HBsAg；ELISA酶标法；胶体金试纸法；检测；漏检乙型肝炎(乙肝)
, 百拇医药
[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2012)09(b)-0175-02
病毒表面抗原(HBsAg)作为输血相关传染病主要筛查项目之一，广泛开展应用酶联免疫吸附试验(ELISA)，在经血传播疾病筛查中起到重要作用，如乙肝、丙肝、艾滋、梅毒检测等。并取得显著成效，其灵敏度和特异性得到国家认可。同时我国作为乙肝大国，乙肝是无偿献血不合格比率主要组成部分之一，如能提高在血液采回血站之前的检出率，将进一步降低经血传播的风险，节约血液资源，降低采供血的各种成本。随着目前医疗科技的进一步发达，胶体金试纸法因不需特殊检测设备和仪器，方便操作的优势，在HBsAg筛查中发挥了较为重要的作用。但当标本中HBsAg在ELISA酶标法测定时滴度太高，易有假阴性情况出现，而导致漏检发生[1]。对HBsAg标本为低滴度时，采用胶体金试纸法进行检测，因检测不出有假阴性情况存在，导致漏诊发生。该研究选择2011年5—10月该站无偿献血者标本，采用国产和进口两种ELISA酶标试剂筛查HBsAg均为阳性的标本185例。分男女两组分别行胶体金试法检测，对两组漏检资料进行回顾性对比分析，再与文献提供的ELISA酶标法提供的漏检情况进行比较，现报告如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料
该站14 309例无偿献血筛查中用国产和进口两种试剂HBsAg均检测为阳性标本185例。为无偿献血者，对其血清标本进行胶体金试纸法对比检测。男性110例，女性75例。
1.2 方法
1.2.1 ELISA酶标法 国产试剂采用珠海丽珠生物工程有限公司生产的(HBsAg)酶标试剂盒，进口试剂采用意大利索林公司生产的(HBsAg)酶标试剂盒，严格按说明书在有效期内操作，行实验同时均行质控检测。结果评定：阳性为OD值>cut off值。洗板机：瑞士FAME24/20型全自动酶免仪。酶标仪：瑞士FAME24/20型全自动酶免仪。
1.2.2 胶体金试纸法 采用胶体金试纸条，在试纸条箭头区内滴2滴全血，后加1滴推进液，行5 min静止后对结果进行判断，只1条红色对比线在测试区为阴性，2条为阳性。
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1.3 统计方法
采用SPSS13.0统计软件，计数资料行χ2检验。
2 结果
2.1 ELISA酶标法
185例血清标本检测中，HBsAg阳性185例。
2.2 胶体金试纸法
185例血清标本检测中，110例男性样品中HBsAg阳性65例，阳性率为59%。75例女性样品中HBsAg阳性40例，阳性率为53%。
HBsAg阳性标本采用胶体金试纸法未检出的80例采用ELISA酶标法检测，OD值较低，但全部为阳性，与cut off值接近，表明此例标本HBsAg浓度相对较低。而现有胶体金法对此例标本灵敏度不够，而造成漏检。根据资料，标本中HBsAg滴度太高，对原血清采用ELISA酶标法检测有后滞现象发生，而导致漏诊出现。
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2.3 胶体金试纸法与ELISA酶标法的漏检情况比较
两者比较差异有统计学意义(P<0.05)，两种方法的漏检情况比较，差异有统计学意义。
2.4 不同性别组比较
ELISA酶标法105例阳性患者中，胶体金试纸法阳性患者中，性别组差异无统计学意义，两组比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。
3 讨论
目前，在临床肝炎病毒中，乙肝发病率占有较高比例，对患者的生命健康和社会稳定造成严重影响，人群中受感染的患者慢性携带者占10%，且乙肝携带患者中大部分将发展至慢性肝炎，具有较严重的危害型。据国内外医学报道，目前判断乙肝患者病情变化以检测乙肝二对半和HBV-DNA的定量作为治疗效果和预后成效的分析依据。但由于乙肝二对半比较复杂和HBV-DNA的特异性指标，检测判断相对棘手。以往对乙肝进行诊断过程中，酶联免疫法为对乙肝两对半进行检测的主要方法，但由于检测结果是患者在对HBV感染后的免疫状态，血清中抗体蛋白存在变性状况，直接影响检测后的结果。有报道采用荧光定量PCR荧光探针法(FQ—PCR)进行实时荧光检测，对反应体扩增后的荧光信号进行捕捉。荧光信号变化到某一值，会呈循环状，利于循环次数与DNA量进行定量，有效对乙肝病毒本身进行检测。采用此方法可直接可靠的对HBV复制情况进行反应，成为有效的判断依据。相关研空显示[2]，采用ELISA进行乙肝两对半进行检测的几种常见模式中，大三阳患者有较高的PCR检测符合率，小三阳符合率表现普通。表明HBeAb有较低的复杂HBV能力。在PCR法检测之下，检测出患者有较低的病毒复制，小三阳对乙肝病毒的复制变化情况表现不明显。通过酶联免疫法检测乙肝二对半为全阴，在PCR法检测的时候，在PCR的高灵敏度检测之下，可以检测变异的HBV变异体，弥补酶联免疫法的不足。, 百拇医药(王业坤)
[关键词] HBsAg；ELISA酶标法；胶体金试纸法；检测；漏检乙型肝炎(乙肝)
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[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2012)09(b)-0175-02
病毒表面抗原(HBsAg)作为输血相关传染病主要筛查项目之一，广泛开展应用酶联免疫吸附试验(ELISA)，在经血传播疾病筛查中起到重要作用，如乙肝、丙肝、艾滋、梅毒检测等。并取得显著成效，其灵敏度和特异性得到国家认可。同时我国作为乙肝大国，乙肝是无偿献血不合格比率主要组成部分之一，如能提高在血液采回血站之前的检出率，将进一步降低经血传播的风险，节约血液资源，降低采供血的各种成本。随着目前医疗科技的进一步发达，胶体金试纸法因不需特殊检测设备和仪器，方便操作的优势，在HBsAg筛查中发挥了较为重要的作用。但当标本中HBsAg在ELISA酶标法测定时滴度太高，易有假阴性情况出现，而导致漏检发生[1]。对HBsAg标本为低滴度时，采用胶体金试纸法进行检测，因检测不出有假阴性情况存在，导致漏诊发生。该研究选择2011年5—10月该站无偿献血者标本，采用国产和进口两种ELISA酶标试剂筛查HBsAg均为阳性的标本185例。分男女两组分别行胶体金试法检测，对两组漏检资料进行回顾性对比分析，再与文献提供的ELISA酶标法提供的漏检情况进行比较，现报告如下。
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1 资料与方法
1.1 一般资料
该站14 309例无偿献血筛查中用国产和进口两种试剂HBsAg均检测为阳性标本185例。为无偿献血者，对其血清标本进行胶体金试纸法对比检测。男性110例，女性75例。
1.2 方法
1.2.1 ELISA酶标法 国产试剂采用珠海丽珠生物工程有限公司生产的(HBsAg)酶标试剂盒，进口试剂采用意大利索林公司生产的(HBsAg)酶标试剂盒，严格按说明书在有效期内操作，行实验同时均行质控检测。结果评定：阳性为OD值>cut off值。洗板机：瑞士FAME24/20型全自动酶免仪。酶标仪：瑞士FAME24/20型全自动酶免仪。
1.2.2 胶体金试纸法 采用胶体金试纸条，在试纸条箭头区内滴2滴全血，后加1滴推进液，行5 min静止后对结果进行判断，只1条红色对比线在测试区为阴性，2条为阳性。
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1.3 统计方法
采用SPSS13.0统计软件，计数资料行χ2检验。
2 结果
2.1 ELISA酶标法
185例血清标本检测中，HBsAg阳性185例。
2.2 胶体金试纸法
185例血清标本检测中，110例男性样品中HBsAg阳性65例，阳性率为59%。75例女性样品中HBsAg阳性40例，阳性率为53%。
HBsAg阳性标本采用胶体金试纸法未检出的80例采用ELISA酶标法检测，OD值较低，但全部为阳性，与cut off值接近，表明此例标本HBsAg浓度相对较低。而现有胶体金法对此例标本灵敏度不够，而造成漏检。根据资料，标本中HBsAg滴度太高，对原血清采用ELISA酶标法检测有后滞现象发生，而导致漏诊出现。
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2.3 胶体金试纸法与ELISA酶标法的漏检情况比较
两者比较差异有统计学意义(P<0.05)，两种方法的漏检情况比较，差异有统计学意义。
2.4 不同性别组比较
ELISA酶标法105例阳性患者中，胶体金试纸法阳性患者中，性别组差异无统计学意义，两组比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。
3 讨论
目前，在临床肝炎病毒中，乙肝发病率占有较高比例，对患者的生命健康和社会稳定造成严重影响，人群中受感染的患者慢性携带者占10%，且乙肝携带患者中大部分将发展至慢性肝炎，具有较严重的危害型。据国内外医学报道，目前判断乙肝患者病情变化以检测乙肝二对半和HBV-DNA的定量作为治疗效果和预后成效的分析依据。但由于乙肝二对半比较复杂和HBV-DNA的特异性指标，检测判断相对棘手。以往对乙肝进行诊断过程中，酶联免疫法为对乙肝两对半进行检测的主要方法，但由于检测结果是患者在对HBV感染后的免疫状态，血清中抗体蛋白存在变性状况，直接影响检测后的结果。有报道采用荧光定量PCR荧光探针法(FQ—PCR)进行实时荧光检测，对反应体扩增后的荧光信号进行捕捉。荧光信号变化到某一值，会呈循环状，利于循环次数与DNA量进行定量，有效对乙肝病毒本身进行检测。采用此方法可直接可靠的对HBV复制情况进行反应，成为有效的判断依据。相关研空显示[2]，采用ELISA进行乙肝两对半进行检测的几种常见模式中，大三阳患者有较高的PCR检测符合率，小三阳符合率表现普通。表明HBeAb有较低的复杂HBV能力。在PCR法检测之下，检测出患者有较低的病毒复制，小三阳对乙肝病毒的复制变化情况表现不明显。通过酶联免疫法检测乙肝二对半为全阴，在PCR法检测的时候，在PCR的高灵敏度检测之下，可以检测变异的HBV变异体，弥补酶联免疫法的不足。, 百拇医药(王业坤)