Real time PCR与常规血培养在血流感染未知病原体鉴定中的比较研究(2)
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1.1 一般资料
该研究纳入的脓毒血症患者为该院各临床科室收治的患者90例,共获取标本108份。其中男52例,女38例,平均年龄(43.5±11.5)岁。其中60例患者(66.7%)来自ICU、麻醉科和肿瘤内科,其他30例(33.3%)来自内科和血液科。93例患者(86.1%)在采集血液时已经接受过抗菌素治疗。
1.2 研究方法
使用静脉穿刺术获取的血液样本同时进行BC和SF。其中血培养采用Becton Dickinson公司生产的Bactec 9120血培养仪,在37 ℃培养1~5 d,并根据相应方法分离并鉴定微生物。同时,将静脉穿刺得到的含有EDTA血液5 mL用于real time PCR分析。其步骤根据SeptiFast Lys、SeptiFast Prep和LightCycler SeptiFast试剂盒的操作进行。real time PCR仪器型号为LightCycler 2.0(Roche)。
1.3 结果分析
根据参考文献提供的方法对微生物进行鉴定[6]。即,所有待检病原体通过识别软件识别特有的峰值,同时设立阳性对照。若对照为阳性,且待测标本无峰值时,结果判定为阴性。
1.4 分析指标
根据鉴定结果,计算real time PCR的灵敏度、特异性、阳性预测值(positive predictive values,PPV)、阴性预测值(negative predictive values,NPV),同时计算两种方法的一致性。
1.5 统计方法
采用SPSS 19 ......
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