血清TK1和CA15—3含量在乳腺癌患者中的变化及临床价值(1)
[摘要] 目的 探讨检测血清TK1和CA15-3在乳腺肿瘤诊断、临床分期及预后中的临床价值。方法 采用酶免疫点印迹化学发光法检测2011年1月—2013年12月该院收治的100例乳腺癌患者、80例乳腺良性疾病、80例正常对照者血清TK1水平，同时采用罗氏电化学发光分析仪检测CA15-3含量。比较乳腺癌患者与乳腺良性疾病及对照组的TK1和CA15-3水平的差异，分析乳腺癌组患者血清CA15-3和TK1水平与淋巴结转移、术后复发及临床分期的关系。结果 乳腺癌组TK1和CA15-3含量明显高于乳腺的良性肿瘤以及健康人群组(P<0.01)， 乳腺的良性肿瘤组与健康人群组差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测CA15-3和TK1能够提高诊断的灵敏度和特异性，血清TK1含量与乳腺癌分期相关，术后2年复发以及有淋巴结转移的患者中， TK1含量显著升高( P<0.05)。结论 血清TK1可为乳腺癌预后判断及病情监测提供重要价值，与CA15-3联合检测能够提高乳腺癌诊断的检出率。
[关键词] 胸苷激酶1； CA15-3；乳腺癌； 临床价值
, http://www.100md.com
[中图分类号] R73 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)12(b)-0001-03
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，近年来患病率逐步上升，就2008年女性新增癌症病例：乳腺癌占23%，死亡人数为14%排名第一位[1]。肿瘤标志物CA15-3是在乳腺癌中应用比较广泛的血清标志物。胸苷激酶(thymidine kinase，TK) 是在细胞质中表达，与细胞增殖有关、参与DNA前体物质合成的关键酶。其分为2种：一种是与细胞的生长、分裂密切相关细胞质胸苷激酶( TK1)；另一种是与细胞分裂周期无关的线粒体胸苷激酶(TK2)。TK1与细胞周期调控相关，因而被认为是一种细胞增殖的标志物[2] 。该研究通过比较该院2011年1月—2013年12月收治的乳腺癌不同临床分期和正常对照者血清中变化，评价CA15-3、TK1以及二者联合检测，对乳腺癌诊断、治疗和预后的价值，现报道如下。
1 资料与方法
, 百拇医药
1.1 一般资料
选择该科收治的乳腺癌患者100例，年龄21～79岁，平均52.3岁，经病理学证实排除了其它肿瘤性疾病。按照国际抗癌联盟和美国肿瘤联合会(2003年修改的)联合制定的TNM法进行分期。其中0期24例，Ⅰ期27例，Ⅱ28例，Ⅲ21例。乳腺良性疾病组80例，年龄20～74岁，平均年龄46.3岁。健康对照组80例，年龄24～68岁，平均年龄40.6岁。3组之间在年龄等方面差异无统计学意义。
1.2 方法
所有实验对象(空腹)清晨采集静脉血。分离血清、放置-80℃保存备用，胸苷激酶1(TK1)采用免疫点印记法测定，仪器和试剂由华瑞同康生物技术(深圳)有限公司提供，并按照试剂盒说明书操作。TK1浓度>2 pmol/L 检查者为细胞增殖风险人群。CA15-3采用罗氏全自动电化学发光免疫分析仪，试剂由罗氏诊断产品(上海)有限公司提供，严格按说明书操作。
, http://www.100md.com
1.3 统计方法
研究数据采用SPSS 17.0 软件包进行统计处理。所得数据是计量资料，进行方差分析。如不同组间差异有统计学意义，则进行Q检验(S-N-K检验)，结果以(x±s)表示。灵敏度、特异度比较用χ2检验。
2 结果
①乳腺癌组TK1和CA15-3含量明显高于乳腺的良性肿瘤及健康人群组(P<0.01)，良性肿瘤组的两种标志物含量与健康人群组差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。
②乳腺癌组的血清TK1和CA15-3含量和术后复发、淋巴转移及临床分期的关系。61例无淋巴转移，39例有淋巴转移，57例无术后复发，43例有术后复发，乳腺癌组的血清TK1和CA15-3含量在术后是否复发及有无淋巴结转移之间差异有统计学意义(P<0.01)；CA15-3含量随着临床分期而变化，除0期与Ⅰ期差异无统计学意义，其余均差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。
, 百拇医药
③一项标志物检测对于乳腺癌诊断存在(灵敏度和特异性)一定局限性，即有一定的漏诊和误诊率，tk1诊断乳腺癌的灵敏度与CA15-3比较差异有统计学意义，联合检测与单独CA15-3、tk1的灵敏度比较差异有统计学意义；CA15-3诊断乳腺癌的特异度与tk1比较差异有统计学意义；联合检测和单独与tk1、CA15-3比较特异度差异有统计学意义。
联合检测TK1和CA15-3含量与单项检测进行灵敏度和特异性比较见表3。
表3 联合检测TK1和CA15-3与单项检测对乳腺癌诊断的比较[n(%)]
注：*tk1诊断乳腺癌的灵敏度与CA15-3比较(P<0.05)， **联合检测与单独CA15-3、tk1的灵敏度比较(P<0.05)；#CA15-3诊断乳腺癌的特异度与tk1比较(P<0.05)；##联合检测与单独与tk1、CA15-3比较特异度(P<0.05)。
, http://www.100md.com
3 讨论
CA15-3是具有明显的肿瘤和器官特异性的乳腺癌相关的糖类抗原，并且高度表达，是乳腺癌诊断和预后判断的重要生物学指标。有文献报道[3]， CA15-3的阳性率在乳腺癌中约为42.42%，部分乳腺癌患者中手术前后及复发转移前、后均有一定差异。美国临床肿瘤学会(临床实践指导原则)规定：进行乳腺癌的筛查、诊断和病情监测不能单独使用CA15-3[4]。因此， 新的研究方向便是寻找新的、简便的、能用于乳腺癌临床监测的血清标志物。存在于细胞质中的同工酶为细胞质胸苷激酶(简称TK1)。TK1参与细胞周期的调控， 与细胞分裂密切相关，能从细胞释放到血清中， 在增殖周期中，TK1在细胞分裂G1期含量比较低，到S期后逐渐升高， 至G2期达到最高[5]。已有研究数据表明，血清TK1可反映非小细胞肺癌[6-7]、肾细胞癌[8]、淋巴瘤[9]和黑色素瘤[10]的预后。该实验结果发现：血清TK1含量在对照组、乳腺良性疾病组及乳腺癌患者中差异有统计学意义。当血清TK1>2.0 pmol/L作为乳腺癌的警界值，可作为人群普查和筛选，能够区分诊断乳腺良性疾病与乳腺癌患者；Ⅱ期、Ⅲ期乳腺癌患者TK1含量显著高于0期、Ⅰ期(P<0.01)，提示：在一定程度上TK1含量能反映肿瘤的进展。然而在0期、Ⅰ期乳腺癌患者的CA15-3的检测值多数落在正常范围内(阳性率< 18%)。在Ⅲ期乳腺癌患者中的阳性率也仅仅约58%；对于乳腺癌诊断的灵敏度和特异性：血清TK1为灵敏度(89.5%) 较高特异性(70.0%)不强、血清CA15-3 为灵敏度(48.0%)较低，而特异性(90.1%)较好，这与杨雅洁等[11-13]报道的一致。因此一般情况下建议联合检测TK1 和CA15-3大大提高乳腺癌诊断效率从而弥补了单项检测的不足[14]，为临床诊断和治疗提供重要的价值，该研究表明，进行多中心、大样本研究乳腺癌的确切机制及Tk1与CA15-3与肿瘤进展间的关联均与乳腺癌分期密切相关。, http://www.100md.com(段春霞 郝艳梅 陈丽霞)
[关键词] 胸苷激酶1； CA15-3；乳腺癌； 临床价值
, http://www.100md.com
[中图分类号] R73 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)12(b)-0001-03
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，近年来患病率逐步上升，就2008年女性新增癌症病例：乳腺癌占23%，死亡人数为14%排名第一位[1]。肿瘤标志物CA15-3是在乳腺癌中应用比较广泛的血清标志物。胸苷激酶(thymidine kinase，TK) 是在细胞质中表达，与细胞增殖有关、参与DNA前体物质合成的关键酶。其分为2种：一种是与细胞的生长、分裂密切相关细胞质胸苷激酶( TK1)；另一种是与细胞分裂周期无关的线粒体胸苷激酶(TK2)。TK1与细胞周期调控相关，因而被认为是一种细胞增殖的标志物[2] 。该研究通过比较该院2011年1月—2013年12月收治的乳腺癌不同临床分期和正常对照者血清中变化，评价CA15-3、TK1以及二者联合检测，对乳腺癌诊断、治疗和预后的价值，现报道如下。
1 资料与方法
, 百拇医药
1.1 一般资料
选择该科收治的乳腺癌患者100例，年龄21～79岁，平均52.3岁，经病理学证实排除了其它肿瘤性疾病。按照国际抗癌联盟和美国肿瘤联合会(2003年修改的)联合制定的TNM法进行分期。其中0期24例，Ⅰ期27例，Ⅱ28例，Ⅲ21例。乳腺良性疾病组80例，年龄20～74岁，平均年龄46.3岁。健康对照组80例，年龄24～68岁，平均年龄40.6岁。3组之间在年龄等方面差异无统计学意义。
1.2 方法
所有实验对象(空腹)清晨采集静脉血。分离血清、放置-80℃保存备用，胸苷激酶1(TK1)采用免疫点印记法测定，仪器和试剂由华瑞同康生物技术(深圳)有限公司提供，并按照试剂盒说明书操作。TK1浓度>2 pmol/L 检查者为细胞增殖风险人群。CA15-3采用罗氏全自动电化学发光免疫分析仪，试剂由罗氏诊断产品(上海)有限公司提供，严格按说明书操作。
, http://www.100md.com
1.3 统计方法
研究数据采用SPSS 17.0 软件包进行统计处理。所得数据是计量资料，进行方差分析。如不同组间差异有统计学意义，则进行Q检验(S-N-K检验)，结果以(x±s)表示。灵敏度、特异度比较用χ2检验。
2 结果
①乳腺癌组TK1和CA15-3含量明显高于乳腺的良性肿瘤及健康人群组(P<0.01)，良性肿瘤组的两种标志物含量与健康人群组差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。
②乳腺癌组的血清TK1和CA15-3含量和术后复发、淋巴转移及临床分期的关系。61例无淋巴转移，39例有淋巴转移，57例无术后复发，43例有术后复发，乳腺癌组的血清TK1和CA15-3含量在术后是否复发及有无淋巴结转移之间差异有统计学意义(P<0.01)；CA15-3含量随着临床分期而变化，除0期与Ⅰ期差异无统计学意义，其余均差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。
, 百拇医药
③一项标志物检测对于乳腺癌诊断存在(灵敏度和特异性)一定局限性，即有一定的漏诊和误诊率，tk1诊断乳腺癌的灵敏度与CA15-3比较差异有统计学意义，联合检测与单独CA15-3、tk1的灵敏度比较差异有统计学意义；CA15-3诊断乳腺癌的特异度与tk1比较差异有统计学意义；联合检测和单独与tk1、CA15-3比较特异度差异有统计学意义。
联合检测TK1和CA15-3含量与单项检测进行灵敏度和特异性比较见表3。
表3 联合检测TK1和CA15-3与单项检测对乳腺癌诊断的比较[n(%)]
注：*tk1诊断乳腺癌的灵敏度与CA15-3比较(P<0.05)， **联合检测与单独CA15-3、tk1的灵敏度比较(P<0.05)；#CA15-3诊断乳腺癌的特异度与tk1比较(P<0.05)；##联合检测与单独与tk1、CA15-3比较特异度(P<0.05)。
, http://www.100md.com
3 讨论
CA15-3是具有明显的肿瘤和器官特异性的乳腺癌相关的糖类抗原，并且高度表达，是乳腺癌诊断和预后判断的重要生物学指标。有文献报道[3]， CA15-3的阳性率在乳腺癌中约为42.42%，部分乳腺癌患者中手术前后及复发转移前、后均有一定差异。美国临床肿瘤学会(临床实践指导原则)规定：进行乳腺癌的筛查、诊断和病情监测不能单独使用CA15-3[4]。因此， 新的研究方向便是寻找新的、简便的、能用于乳腺癌临床监测的血清标志物。存在于细胞质中的同工酶为细胞质胸苷激酶(简称TK1)。TK1参与细胞周期的调控， 与细胞分裂密切相关，能从细胞释放到血清中， 在增殖周期中，TK1在细胞分裂G1期含量比较低，到S期后逐渐升高， 至G2期达到最高[5]。已有研究数据表明，血清TK1可反映非小细胞肺癌[6-7]、肾细胞癌[8]、淋巴瘤[9]和黑色素瘤[10]的预后。该实验结果发现：血清TK1含量在对照组、乳腺良性疾病组及乳腺癌患者中差异有统计学意义。当血清TK1>2.0 pmol/L作为乳腺癌的警界值，可作为人群普查和筛选，能够区分诊断乳腺良性疾病与乳腺癌患者；Ⅱ期、Ⅲ期乳腺癌患者TK1含量显著高于0期、Ⅰ期(P<0.01)，提示：在一定程度上TK1含量能反映肿瘤的进展。然而在0期、Ⅰ期乳腺癌患者的CA15-3的检测值多数落在正常范围内(阳性率< 18%)。在Ⅲ期乳腺癌患者中的阳性率也仅仅约58%；对于乳腺癌诊断的灵敏度和特异性：血清TK1为灵敏度(89.5%) 较高特异性(70.0%)不强、血清CA15-3 为灵敏度(48.0%)较低，而特异性(90.1%)较好，这与杨雅洁等[11-13]报道的一致。因此一般情况下建议联合检测TK1 和CA15-3大大提高乳腺癌诊断效率从而弥补了单项检测的不足[14]，为临床诊断和治疗提供重要的价值，该研究表明，进行多中心、大样本研究乳腺癌的确切机制及Tk1与CA15-3与肿瘤进展间的关联均与乳腺癌分期密切相关。, http://www.100md.com(段春霞 郝艳梅 陈丽霞)