雅培CELL—DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞的准确性评价
[摘要] 目的 探讨雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞(NRBC)的准确性。 方法 2012年3月—2014年2月取镜检确认的外周血涂片有NRBC的标本102例，分别用显微镜镜检计数法和细胞计数仪法两种方法计数，得到两组数据进行比较分析。结果 当标本中NRBC百分比<5%时，两种检测方法比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞准确。当标本中NRBC百分比≥5%时，差异有统计学意义，两种检测方法有明显差异，说明在此种情况下检测有一定偏差。 结论 雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞时准确性较差，如在检测时有NRBC的提示时，一定要推血涂片镜检计数，并用公式计算出白细胞总数。
[关键词] 有核红细胞；雅培CELL-DYN Ruby；显微镜镜检
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)12(c)-0026-02
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除新生儿以外，健康成人外周血中不会出现有核红细胞[1]，只有在病理状态下才会出现。因此，对外周血有核红细胞的准确计数对疾病的鉴别、病情的诊断、疗效观察、有着重要的意义[2]。随着血细胞分析仪功能的不断完善，有核红细胞在血细胞分析仪上也能检测。2012年3月—2014年2月通过对外周血中还有有核红细胞的标本进行雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪计数和金标准法血涂片显微镜镜检计数法相比较进行统计学分析，对雅培CELL-DYN Ruby计数NRBC的准确性评估，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
该院经过染色镜检确认的外周血中存在有核红细胞的成人标本102例。其中，溶血性贫血52例、白血病35例、MDS8例、骨髓纤维化6例、红血病1例。
1.2 仪器与试剂
, 百拇医药
①美国雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪，原厂试剂、质控液、校准液；②奥林巴斯CX-21显微镜；③贝索瑞氏-吉姆萨染液。
1.3 实验方法
患者2 mL，在4 h内分别进行CD+NRBC计数并制作血涂片3张进行镜检计数。①CD+NRBC计数：将雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪调至Ready状态，用雅培质控血在多规则质控规则下进行室内质控，室内质控通过后将仪器模式调到CD+NRBC模式。分别对患者采集的EDTA-K2抗凝血进行标号，应用手动加样方式将标本进行计数。每份标本计数三次，记录NRBC的百分数值取平均值做为该标本仪器计数的结果。②镜检计数：取患者采集的EDTA-K2抗凝血50 uL滴于干净玻片上制作三张血涂片，放于玻片架上20 min待血涂片干燥后，用贝索瑞氏-吉姆萨染液A液滴于血涂片上至全部覆盖3 min，再将B液滴于血涂片上用吸尔球将染液混匀，静置5 min用清水冲洗血涂片，晾干后分别由三名有经验阅片老师在奥林巴斯CX-21显微镜下对血涂片进行有核红细胞镜检计数，计数100个有核细胞，计算NRBC的百分比，取三个结果的平均值作为镜检计数的结果。
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1.4 统计方法
应用SPSS13.0统计学软件对研究数据进行统计分析，计量资料采用t检验。
2 结果
取镜检确认的外周血涂片有NRBC的标本102例，分别用显微镜镜检计数法和细胞计数仪法两种方法计数，对比研究结果显示，当标本中NRBC百分比<5%时，两种检测方法比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞准确。当标本中NRBC百分比≥5%时，差异有统计学意义，两种检测方法差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。
表1 两种方法差异情况对比(x±s)
3组数据中当NRBC<5%时无统计学意义，仪器法和镜检法检测NRBC无明显差别，雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测NRBC准确。当NRBC≥5%时，其余两组数据有统计学意义，两种方法有检测NRBC有差异，雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测NRBC有误差。
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3 讨论
血细胞分析仪自动计数外周血中NRBC是近年来发展起来的一项新技术，逐渐开始应用于临床[3-4]。随着日益增多的血液病患者，外周血有核红细胞的检测也显得尤为重要。由于NRBC的检测技术应用时间较短，临床特别需要了解其方法学特点诊断效率及应用范围等，该研究正是对上述内容的进行探讨。美国雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪是具有四种检测模式CD、CD+NWBC、CD+NRBC、网织红细胞，我们在这里用到CD和CD+NRBC模式。在CD模式下计数白细胞是将红细胞溶解后，在鞘流的作用下对剩下的细胞核进行计数得到白细胞总数，如果标本里含有NRBC这样就计数在白细胞数内，造成白细胞偏高，有核细胞未被检出[5-6]。而对含有NRBC的标本在CD+NRBC模式下检测，标本会得到进一步处理，延长红细胞的裂解时间，并在孵育池内添加了活性物质，使有核红细胞充分溶解后，在注入计数池计数，得到白细胞数。这样可以计算出有核红细胞的数量，使白细胞数更为准确。外周血中出现NRBC时，生理性主要见于新生儿。病理性主要见于(1)增生性贫血：各种溶血性贫血、急性失血、巨幼贫等。(2)骨髓造血功能异常：MDS、红血病、红白血病、白血病。(3)髓外造血、骨髓纤维化。(4)人体严重缺氧[7-10]。本实验包括了大部分病例，通过该次试验对雅培CELL-DYN Ruby检测NRBC做了评估。
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该研究取镜检确认的外周血涂片有NRBC的标本102例，分别用显微镜镜检计数法和细胞计数仪法两种方法计数，结果显示，当标本中NRBC百分比<5%时，两种检测方法比较，相关性良好，相关系数为0.938，差异无统计学意义(P<0.05)，说明雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞准确。当标本中NRBC百分比≥5%时，两种方法的相关性随着有核红细胞的数量增加而变大，相关系数为0.622，差异有统计学意义，两种检测方法有明显差异，说明在此种情况下检测有一定偏差。健康成人外周血片中找到1NRBC/100WBC就有意义，但过去认为≥2NRBC/100WBC时临床才有意义且需要报告，≥10NRBC/100WBC时需校正WBC总数。该研究结果表明，仪器法NRBC≥5.00%时，有82.2%以上的标本仪器检测结果大于手工法结果。如果有NRBC报警提示时就需要进行CBC+NRBC研究提示，雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞时准确性较差，如在检测时有NRBC的提示时，一定要推血涂片镜检计数，并用公式计算出白细胞总数。综上所述：雅培CELL-DYN Ruby血细胞分析仪对有核红细胞的计数不能代替显微镜镜检计数。在仪器提示NRBC时，打开CD+NRBC模式不能准确的排除有核红细胞的干扰。必须进行显微镜染色镜检计数，利用公式进行计算出白细胞总数以及NRBC的百分比，时至今日仍是血液病诊断重要的方法[6]。
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[参考文献]
[1] 许根友.学习《全国临床检验操作规程》(第3版)第一篇对检验工作的实际意义[J].临床血液学杂志：输血与检验版，2010，23(6)：759-760.
[2] 杨晓枫.XE-2100全自动血细胞分析仪对有核红细胞分析的应用评价[J].临床和实验医学杂志，2013(1)：51-52.
[3] 陈海生，张劲丰，邬华坤，等.外周血有核红细胞自动检测应用研究[J].现代医院，2011，11(6)：69-70.
[4] 朱建锋，张莉，王蓓丽，等.血细胞分析仪对外周血有核红细胞计数性能的评价[J].检验医学与临床，2014，11(13)：25-27.
[5] 孙娟，李筱梅，慕悦意，等.XE-5000血细胞分析仪计数有核红细胞的性能评价[J].中国血液流变学杂志，2013(3)：544-546.
, 百拇医药
[6] 王也飞，周怡，丁磊，等.SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪计数有核红细胞的准确性评价[J].检验医学，2014(3)：262-265.
[7] 陆作洁，农少云.外周血涂片中出现有核红细胞的临床意义探讨[J].国际检验医学杂志，2013，34(19)：2605-2607.
[8] Fischer JC，Moog R，Giers G. Quality control of leucocyte-reduced blood components：overestimation of WBC content due to nucleated red blood cells[J].Vox Sanguinis，2012(1)：79-81.
[9] 唐劲光，杨峥.L H 7 5 0血细胞分析仪检测有核红细胞的准确性评价[J].检验医学与临床，2013，4(10)：830-831.
[10] 王士磊.Sysmex XT-4000i血细胞分析仪检测有核红细胞报警功能评价[J].中国煤炭工业医学杂志，2013(12)：1998-1999.
(收稿日期：2014-10-28), 百拇医药(王振昊 李静)
[关键词] 有核红细胞；雅培CELL-DYN Ruby；显微镜镜检
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2014)12(c)-0026-02
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除新生儿以外，健康成人外周血中不会出现有核红细胞[1]，只有在病理状态下才会出现。因此，对外周血有核红细胞的准确计数对疾病的鉴别、病情的诊断、疗效观察、有着重要的意义[2]。随着血细胞分析仪功能的不断完善，有核红细胞在血细胞分析仪上也能检测。2012年3月—2014年2月通过对外周血中还有有核红细胞的标本进行雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪计数和金标准法血涂片显微镜镜检计数法相比较进行统计学分析，对雅培CELL-DYN Ruby计数NRBC的准确性评估，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
该院经过染色镜检确认的外周血中存在有核红细胞的成人标本102例。其中，溶血性贫血52例、白血病35例、MDS8例、骨髓纤维化6例、红血病1例。
1.2 仪器与试剂
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①美国雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪，原厂试剂、质控液、校准液；②奥林巴斯CX-21显微镜；③贝索瑞氏-吉姆萨染液。
1.3 实验方法
患者2 mL，在4 h内分别进行CD+NRBC计数并制作血涂片3张进行镜检计数。①CD+NRBC计数：将雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪调至Ready状态，用雅培质控血在多规则质控规则下进行室内质控，室内质控通过后将仪器模式调到CD+NRBC模式。分别对患者采集的EDTA-K2抗凝血进行标号，应用手动加样方式将标本进行计数。每份标本计数三次，记录NRBC的百分数值取平均值做为该标本仪器计数的结果。②镜检计数：取患者采集的EDTA-K2抗凝血50 uL滴于干净玻片上制作三张血涂片，放于玻片架上20 min待血涂片干燥后，用贝索瑞氏-吉姆萨染液A液滴于血涂片上至全部覆盖3 min，再将B液滴于血涂片上用吸尔球将染液混匀，静置5 min用清水冲洗血涂片，晾干后分别由三名有经验阅片老师在奥林巴斯CX-21显微镜下对血涂片进行有核红细胞镜检计数，计数100个有核细胞，计算NRBC的百分比，取三个结果的平均值作为镜检计数的结果。
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1.4 统计方法
应用SPSS13.0统计学软件对研究数据进行统计分析，计量资料采用t检验。
2 结果
取镜检确认的外周血涂片有NRBC的标本102例，分别用显微镜镜检计数法和细胞计数仪法两种方法计数，对比研究结果显示，当标本中NRBC百分比<5%时，两种检测方法比较，差异无统计学意义(P>0.05)，说明雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞准确。当标本中NRBC百分比≥5%时，差异有统计学意义，两种检测方法差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。
表1 两种方法差异情况对比(x±s)
3组数据中当NRBC<5%时无统计学意义，仪器法和镜检法检测NRBC无明显差别，雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测NRBC准确。当NRBC≥5%时，其余两组数据有统计学意义，两种方法有检测NRBC有差异，雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测NRBC有误差。
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3 讨论
血细胞分析仪自动计数外周血中NRBC是近年来发展起来的一项新技术，逐渐开始应用于临床[3-4]。随着日益增多的血液病患者，外周血有核红细胞的检测也显得尤为重要。由于NRBC的检测技术应用时间较短，临床特别需要了解其方法学特点诊断效率及应用范围等，该研究正是对上述内容的进行探讨。美国雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪是具有四种检测模式CD、CD+NWBC、CD+NRBC、网织红细胞，我们在这里用到CD和CD+NRBC模式。在CD模式下计数白细胞是将红细胞溶解后，在鞘流的作用下对剩下的细胞核进行计数得到白细胞总数，如果标本里含有NRBC这样就计数在白细胞数内，造成白细胞偏高，有核细胞未被检出[5-6]。而对含有NRBC的标本在CD+NRBC模式下检测，标本会得到进一步处理，延长红细胞的裂解时间，并在孵育池内添加了活性物质，使有核红细胞充分溶解后，在注入计数池计数，得到白细胞数。这样可以计算出有核红细胞的数量，使白细胞数更为准确。外周血中出现NRBC时，生理性主要见于新生儿。病理性主要见于(1)增生性贫血：各种溶血性贫血、急性失血、巨幼贫等。(2)骨髓造血功能异常：MDS、红血病、红白血病、白血病。(3)髓外造血、骨髓纤维化。(4)人体严重缺氧[7-10]。本实验包括了大部分病例，通过该次试验对雅培CELL-DYN Ruby检测NRBC做了评估。
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该研究取镜检确认的外周血涂片有NRBC的标本102例，分别用显微镜镜检计数法和细胞计数仪法两种方法计数，结果显示，当标本中NRBC百分比<5%时，两种检测方法比较，相关性良好，相关系数为0.938，差异无统计学意义(P<0.05)，说明雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞准确。当标本中NRBC百分比≥5%时，两种方法的相关性随着有核红细胞的数量增加而变大，相关系数为0.622，差异有统计学意义，两种检测方法有明显差异，说明在此种情况下检测有一定偏差。健康成人外周血片中找到1NRBC/100WBC就有意义，但过去认为≥2NRBC/100WBC时临床才有意义且需要报告，≥10NRBC/100WBC时需校正WBC总数。该研究结果表明，仪器法NRBC≥5.00%时，有82.2%以上的标本仪器检测结果大于手工法结果。如果有NRBC报警提示时就需要进行CBC+NRBC研究提示，雅培CELL-DYN Ruby全自动血细胞分析仪检测有核红细胞时准确性较差，如在检测时有NRBC的提示时，一定要推血涂片镜检计数，并用公式计算出白细胞总数。综上所述：雅培CELL-DYN Ruby血细胞分析仪对有核红细胞的计数不能代替显微镜镜检计数。在仪器提示NRBC时，打开CD+NRBC模式不能准确的排除有核红细胞的干扰。必须进行显微镜染色镜检计数，利用公式进行计算出白细胞总数以及NRBC的百分比，时至今日仍是血液病诊断重要的方法[6]。
, http://www.100md.com
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(收稿日期：2014-10-28), 百拇医药(王振昊 李静)