1 材料与方法

    1.1 细胞及主要试剂

    实验时间为2014年1月—2015年1月，A549、HCC827、SK-MES-1细胞株均购自中国科学院细胞库， 吉非替尼由英国Astra Zeneca有限公司惠赠。F12K培养基、RPMI-1640培养基、MEM培养基购于HyClone公司。胎牛血清购于天津康源生物有限公司；0.25%胰酶-EDTA购自HyClone公司；CCK-8试剂盒购自日本化工公司；DMSO购自Sigma公司；细胞RNA提取试剂盒购自北京康为世纪生物科技有限公司；PCR反转录试剂盒购自TaKaRa公司；PCR试剂盒购自上海生工生物工程股份有限公司；RT-PCR试剂盒购自TaKaRa公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养与分组 ①A549细胞培养于含 10% FBS的F12K培养基中。②HCC827细胞培养于含10%FBS的RPMI-1640培养基中。③SK-MES-1细胞培养于含10%FBS的MEM培养基中。细胞贴壁80%时以0.25%胰酶消化重悬，调整细胞密度按氧条件、药物浓度分组，待各组细胞处于对数生长期，实验组加入相应浓度吉非替尼，对照组加相应体积的二甲基亚砜溶液。

    1.2.2 药物配制和使用 取gefitinib(250 mg/片)一片制成粉末，溶于4 mLDMSO配制成140 mmol/L的药物原液置于-20℃保存 ......