探究肿瘤靶向物载体的细胞靶向性(2)
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择293T细胞和H460细胞作为实验标本，，实验地点选择该院实验室，选择合成的SP5-52、阿霉素、第4代聚酰胺—胺、超滤离心管、荧光分子异硫氰酸荧光素等；所使用的仪器包括紫外可见分光光度计721/721-100型、流式细胞仪贝克曼型、二氧化碳培养箱BPN-50CH(uv)型。
1.2 方法
首先进行靶向载体的合成以及鉴定，需要对PAMAM利用部分乙酰化来减少材料的毒性，保证生物相容性得到提升，并把荧光探针分子FITC共价和载体进行连接，把SP5-52肽利用丁二酸酐手臂共价和载体进行连接，获得相应产物[3]。所有反应步骤的产物都利用氢核磁共振波谱法进行鉴定，并对粒径进行检测。
其次，对冻存的H460细胞和293T细胞进行复苏，并使用具有10%的新生胎牛血清RPM11640P培养液、在含有5%的二氧化碳培养箱中进行培养，控制温度37℃恒温，将显微镜倒置来对细胞生长状态进行逐日观察，当细胞生长超过孔的90%左右时，需要键入1ml的消化液进行消化，并以1：5的比例进行传代。
再者，利用MTT实验对材料细胞的毒性进行检测 ......
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1.1 一般资料
选择293T细胞和H460细胞作为实验标本，，实验地点选择该院实验室，选择合成的SP5-52、阿霉素、第4代聚酰胺—胺、超滤离心管、荧光分子异硫氰酸荧光素等；所使用的仪器包括紫外可见分光光度计721/721-100型、流式细胞仪贝克曼型、二氧化碳培养箱BPN-50CH(uv)型。
1.2 方法
首先进行靶向载体的合成以及鉴定，需要对PAMAM利用部分乙酰化来减少材料的毒性，保证生物相容性得到提升，并把荧光探针分子FITC共价和载体进行连接，把SP5-52肽利用丁二酸酐手臂共价和载体进行连接，获得相应产物[3]。所有反应步骤的产物都利用氢核磁共振波谱法进行鉴定，并对粒径进行检测。
其次，对冻存的H460细胞和293T细胞进行复苏，并使用具有10%的新生胎牛血清RPM11640P培养液、在含有5%的二氧化碳培养箱中进行培养，控制温度37℃恒温，将显微镜倒置来对细胞生长状态进行逐日观察，当细胞生长超过孔的90%左右时，需要键入1ml的消化液进行消化，并以1：5的比例进行传代。
再者，利用MTT实验对材料细胞的毒性进行检测 ......
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