1.2 方法

    抽取两组患者3 mL静脉血作为标本检测血清ADA水平，抽取6 mL静脉血(加入肝素抗凝剂)作为标本进行T-spot.TB试验。该次检测仪器采用日立7180生化分析仪，腺苷脱氨酶检测试剂盒，4～24 U/L为正常参考值范围。

    T-spot.TB试剂盒，利用Ficoll淋巴细胞分离液、RPMI1640培养液获取单个血浆核细胞(PBMCs)，加入AIM-V培养液配置2.5×105 mL浓度PBMCs备用。在T-spot.TB试剂盒微孔板上分别添加50 uL植物血凝素(PHA)为阳性对照孔，添加50 uL AIM-V培养液为阴性对照孔，A检测孔为50 uL结核分枝杆菌特异抗原ESAT-6，B检测孔为50 uL抗原CFP-10，然后再将100 uL标准溶液加入微孔内。将微孔板放置于5%CO2培养箱、37℃条件下孵育15～20 h左右。然后再添加碱性磷酸酶标记二抗放置在3～8℃条件下孵育1 h。最后添加底物显色溶液放置于室温下孵育5～7 min。利用离子水、蒸馏水将终止反应充分洗涤干净，通过放大镜观察并记录每个孔的颜色斑点 ......