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编号:13052260
谷氨酸钠肥胖大鼠下丘脑腹内、外侧核胃动素的表达研究(2)
http://www.100md.com 2017年5月5日 《中外医疗》 2017年第13期
     1 材料和方法

    1.1 肥胖模型制作

    新生Wistar大鼠60只,雄性,体重(48.14 ±6.70)g,合格证号:scxk(鲁)2014-0006。按照随机平均原则分为实验组和对照组,各30只。在第2、4、6、8、10天分别给实验组大鼠皮下注射谷氨酸钠,对照组皮下注射等量生理盐水,3 mg/g体重,共5次。饲养至满月后进行断奶,饲养期间两组均给予常规饲料和水,一直持续8周时间,每天测量所有Wistar大鼠的体重及体长,并做好实验记录。然后根据Lee指数进行筛选计算,挑选出符合实验标准的Wistar大鼠。实验组肥胖大鼠和对照组正常大鼠各26只。

    1.2 动物取材

    所有合格大鼠均于出生后90 d时,断头取材。用10%的水合氯醛(国药准字H37022673)3 mL/kg行腹腔注射麻醉后,打开暴露大鼠的胸腔, 经左心室穿刺至主动脉,先用500 mL生理盐水冲洗,再用500 mL多聚甲醛(40 g/L)经升主动脉缓慢灌注,大约2 h。选择两组中灌注相对较好的实验大鼠各22只,采用断头开颅取下丘脑组织,取出后先用生理盐水进行冲洗,之后再用多聚甲醛(国药准字Z20090250)40 g/L固定8 h后,在20%蔗糖溶液中进行脱水,包埋。

    1.3 ABC法免疫组化染色

    利用Koning等的大鼠脑定位图谱,从大鼠下丘脑的腹内侧核和腹外侧核隆起所在的平面进行切片 ......
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