NF—kB在肝癌中表达及其与上皮间质转化的关系(1)
[摘要] 目的 探讨核转录因子NF-kB在肝癌中的表达情况及其与肝癌上皮间质转化(EMT)的关系。方法 (1)方便收集福建省龙岩市第二医院2014年12月—2015年10月肝癌患者12例外周血样本，采用CanPatrol CTC二代富集技术分离循环肿瘤细胞(CTCs)；②采用RNA原位杂交(RNA-ISH)技术，鉴定CTCs类型和检测NF-kB的表达。结果 91.7%(11/12)肝癌患者外周血样本中检测出CTCs，根据EMT标志物，CTCs可被分为3个亚群，包括上皮型CTCs，上皮/间质混合型CTCs和间质型CTCs。间质型CTCs、NF-kB在肝癌外周血中表达率分别为66.7%(8/12)、83.3%(10/12)；NF-kB表达与CTCs检出率、间质型CTCs表达显著相关(P<0.05)。结论 NF-kB可能和肝癌的EMT发生有关，并促进肿瘤转移。
[关键词] 肝癌；NF-kB；循环肿瘤细胞；EMT
[中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2017)06(b)-0019-03
[Abstract] Objective To study the expression of NF-kB in liver cancer and correlation with epithelial-mesenchymal transition. Methods Convenient selection The peripheral blood samples of 12 cases of liver cancer patients admitted and treated in our hospital from December 2014 to October 2015 were collected and the CTCs was isolated by the CanPatrol CTC second-generation enrichment technique， and the CTCs type was identified by the RNA-ISH and the expression of NF-kB was tested. Results The CTCs was tested in the peripheral blood samples of 91.7%(11/12) liver cancer patients， and CTCs could be divided into three subgroups according to the marker of EMT， including epitheliated type CTCs， epithelial / interstitial mixed type CTCs and interstitial type CTCs， and the expression rate of interstitial type CTCs and NF-kB in the peripheral blood of liver cancer was respectively 66.7%(8/12)and 83.3%(10/12)， and the expression of NF-kB was obviously correlated with the test rate of CTCs and expression of interstitial type CTCs(P<0.05). Conclusion NF-kB may be related to the occurrence of EMT of liver cancer and promote the neoplasm metastasis.
[Key words] Liver cancer； NF-kB； Circulating tumor cell； EMT
循環肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells，CTCs)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，CTCs的出现是发生远处转移的前提，是形成转移灶的关键环节。肿瘤细胞在进入外周血循环的过程中会发生上皮-间质转化(Epithelial Mesenchymal Transition，EMT)，因此，根据EMT标志物，CTCs可被分为：上皮型CTCs，上皮/间质混合型CTCs和间质型CTCs，其中间质型CTC具有更强的转移潜能。核转录因子NF-kB可激活细胞因子或其受体基因转录，促进了非调节性淋巴细胞的生长而阻断凋亡[1]。近来研究表明，NF-kB不仅可导致肿瘤的发生，还与肿瘤浸润、转移存在密切关系。该研究方便收集福建省龙岩市第二医院2014年12月—2015年10月肝癌患者12例外周血样本，旨在应用CanPatrol CTC二代富集技术联合RNA原位杂交技术分离和鉴定肝癌患者CTCs，并检测NF-kB在肝癌中的表达，进一步分析NF-kB与肝癌EMT的关系，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
该研究方便收集了福建省龙岩市第二医院肝癌患者12例，男5例，女7例，年龄22～93岁，中位年龄58.5岁，全部病例经组织病理学检查确诊为肝癌。
1.2 方法
1.2.1 主要试剂 分型杂交探针、NF-kB检测探针由上海生工公司合成；154 mM NH4Cl、10 mM KHCO3、0.1 mM EDTA、4%多聚甲醛溶液、PBS、DAPI、0.1×SSC、30%马血清、1.5%SDS、3 mM Tris-HCl (pH=8.0)。
1.2.2 样本采集 严格消毒后，应用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝采血管采集肘正中静脉血5 mL静脉血，采集后置于4℃保存并于4 h内富集分离肿瘤细胞。, 百拇医药(卢穗万 曾文龙 阙敢波 简以增 余强锋 张洪彬 黄腾钦 潘伟华 陈煌祥)
[关键词] 肝癌；NF-kB；循环肿瘤细胞；EMT
[中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2017)06(b)-0019-03
[Abstract] Objective To study the expression of NF-kB in liver cancer and correlation with epithelial-mesenchymal transition. Methods Convenient selection The peripheral blood samples of 12 cases of liver cancer patients admitted and treated in our hospital from December 2014 to October 2015 were collected and the CTCs was isolated by the CanPatrol CTC second-generation enrichment technique， and the CTCs type was identified by the RNA-ISH and the expression of NF-kB was tested. Results The CTCs was tested in the peripheral blood samples of 91.7%(11/12) liver cancer patients， and CTCs could be divided into three subgroups according to the marker of EMT， including epitheliated type CTCs， epithelial / interstitial mixed type CTCs and interstitial type CTCs， and the expression rate of interstitial type CTCs and NF-kB in the peripheral blood of liver cancer was respectively 66.7%(8/12)and 83.3%(10/12)， and the expression of NF-kB was obviously correlated with the test rate of CTCs and expression of interstitial type CTCs(P<0.05). Conclusion NF-kB may be related to the occurrence of EMT of liver cancer and promote the neoplasm metastasis.
[Key words] Liver cancer； NF-kB； Circulating tumor cell； EMT
循環肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells，CTCs)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，CTCs的出现是发生远处转移的前提，是形成转移灶的关键环节。肿瘤细胞在进入外周血循环的过程中会发生上皮-间质转化(Epithelial Mesenchymal Transition，EMT)，因此，根据EMT标志物，CTCs可被分为：上皮型CTCs，上皮/间质混合型CTCs和间质型CTCs，其中间质型CTC具有更强的转移潜能。核转录因子NF-kB可激活细胞因子或其受体基因转录，促进了非调节性淋巴细胞的生长而阻断凋亡[1]。近来研究表明，NF-kB不仅可导致肿瘤的发生，还与肿瘤浸润、转移存在密切关系。该研究方便收集福建省龙岩市第二医院2014年12月—2015年10月肝癌患者12例外周血样本，旨在应用CanPatrol CTC二代富集技术联合RNA原位杂交技术分离和鉴定肝癌患者CTCs，并检测NF-kB在肝癌中的表达，进一步分析NF-kB与肝癌EMT的关系，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
该研究方便收集了福建省龙岩市第二医院肝癌患者12例，男5例，女7例，年龄22～93岁，中位年龄58.5岁，全部病例经组织病理学检查确诊为肝癌。
1.2 方法
1.2.1 主要试剂 分型杂交探针、NF-kB检测探针由上海生工公司合成；154 mM NH4Cl、10 mM KHCO3、0.1 mM EDTA、4%多聚甲醛溶液、PBS、DAPI、0.1×SSC、30%马血清、1.5%SDS、3 mM Tris-HCl (pH=8.0)。
1.2.2 样本采集 严格消毒后，应用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝采血管采集肘正中静脉血5 mL静脉血，采集后置于4℃保存并于4 h内富集分离肿瘤细胞。, 百拇医药(卢穗万 曾文龙 阙敢波 简以增 余强锋 张洪彬 黄腾钦 潘伟华 陈煌祥)