1 材料与方法

    1.1 PTEN基因沉默

    人胰腺癌PANC-1細胞购于中科院生物化学与细胞生物学研究所，以慢病毒转导法沉默PANC-1细胞PTEN的表达。首先将含荧光素酶和PTEN的shRNA分别转导入人胰腺癌PANC-1细胞，转导24 h后更换培养基，随后在转导后的第36、48、60、72 h获取上清液，并将获得的上清液过滤、离心及重悬浮，最后把含有shLuc或shPTEN的慢病毒颗粒以适当浓度转导入人胰腺癌PANC-1细胞。用Western blot法检验PTEN基因沉默的效果。

    1.2 细胞培养及处理

    以含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基分别培养PTEN正常表达和低表达的PANC-1细胞，首先用10 μL/mL的康莱特注射液或去离子水处理细胞48 h，以流式细胞术检验胰腺癌细胞凋亡改变。

    1.3 细胞凋亡检测

    把收获、洗涤后的PTEN正常表达和低表达的人胰腺癌PANC-1细胞分别加入10 μL异硫氰酸荧光素和10 μL碘化丙啶 ......