探讨HBV—DNA定量检测核酸提取过程中的影响因素分析(2)
1 资料与方法1.1 一般资料
该研究方便中心血站经ELISA检测两次的75份合格血液样本为研究对象,其中,检出HBV真阳性25例,其中包括男性15例,女性10例;年龄最大52岁,年龄最小21岁,平均年龄为(38.86±2.31)岁。非活动性HBsAg携带者20例,其中包括男性11例,女性9例;年龄最大51岁,年龄最小20岁,平均年龄为(38.75±2.46)岁。轻度慢性乙型肝炎受检者30例,其中包括男性18例,女性12例;年龄最大50岁,年龄最小20岁,平均年龄为(38.96±2.54)岁。所有入选病例均经医院伦理委员会批准,且患者和家属知情同意。
1.2 研究方法
浓缩液:标准组的浓缩液剂量为100 μL,A1的浓缩液剂量为90 μL,A2的浓缩液剂量为95 μL,A3的浓缩液剂量为105 μL,A4的浓缩液剂量为110 μL。五组除浓缩液剂量不同外,其余操作方式均按照说明书的要求进行操作。
沉淀摇匀方式:标准组的沉淀摇匀方式为直接敲打混匀15 s,B1的沉淀摇匀方式为漩涡振荡仪振荡15 s,B2组沉淀摇匀方式为漩涡振荡仪振荡30 s,B3沉淀摇匀方式为56℃预热120 s再漩涡振荡15 s,B4沉淀摇匀方式为56℃预热180 s再漩涡振荡15 s。五组除沉淀摇匀方式不同外,其余操作方式均按照说明书的要求进行操作。
裂解煮沸时间:标准组的裂解煮沸时间为10 min,C1的裂解煮沸时间为6 min ......
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