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编号:13348614
糜烂型口腔扁平苔藓患者EBi3、IL—12p35的表达及临床意义(2)
http://www.100md.com 2019年3月5日 《中外医疗》 2019年第7期
     1.2 方法

    采取免疫组织化学法检测其EBi3 及IL-12p35 阳性表达情况,选取胎盘组织作为阳性对照,选取PPS缓冲液作为阴性对照,具体操作步骤:①烤片:将所得石蜡组织切片放入电热恒温培养干燥箱(60℃)中进行烤片,持续90 min;②脱蜡:使用二甲苯脱蜡15~20 min,共3次;③用95%酒精水化5 min;蒸馏水冲洗3 min,共3次;用PBS缓冲液洗涤3 min,3~4次;④抗原修复,将组织切片置于耐高温塑料切片架上进行高温高压修复,随后将其置入含有EDTA抗原修复液(北京鼎国生物技术有限责任公司)的器皿中,经高温加热处理后,取出器皿,冷却至室温;⑤用PBS缓冲液洗涤5 min,3~4次;⑥滴加浓度3%H2O2去离子水,室温下孵育持续10 min,随后用PBS缓冲液洗涤5 min,3~4次;⑦滴加一抗,选取鼠抗人Ebi3单克隆抗体(英国NOVUWS生物科研有限公司)、兔抗人IL-12p35多克隆抗体(上海酶研生物科技有限公司),4℃冰箱孵育过夜,次日取出,将其置于温箱(37℃)中,孵育持续30 min,用PBS缓冲液洗涤5 min ......
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